【摘 要】
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目的本研究探讨Yes相关蛋白(YAP)对胃癌BGC823细胞凋亡的影响。方法 BGC823细胞中转染YAP小干扰RNA(YAP siRNA1、YAP siRNA2),用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别测定细胞中YAP表达
【基金项目】
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河南省科技发展计划重点攻关资助项目(112102310121)
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目的本研究探讨Yes相关蛋白(YAP)对胃癌BGC823细胞凋亡的影响。方法 BGC823细胞中转染YAP小干扰RNA(YAP siRNA1、YAP siRNA2),用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别测定细胞中YAP表达,筛选干扰效果较好的YAP siRNA1做后续实验。MTT测定细胞增殖,平板克隆实验测定克隆形成能力,流式细胞术测定凋亡情况,分光光度法检测Caspase-3、Caspase-9活性,蛋白质印迹法检测β-catenin、c-myc、CyclinD1蛋白水平。用Wnt/β-catenin的激活剂处理下调YAP后的BGC823细胞,按照上述方法测定细胞增殖凋亡和克隆形成能力。结果 YAP siRNA1、YAP siRNA2下调BGC823细胞中YAP的转录和表达,YAP siRNA1对YAP表达的干扰效率较好。敲低YAP后的细胞增殖能力、克隆形成能力降低,细胞凋亡率由(6.32±0.58)%升高至(32.71±2.64)%,Caspase-3、Caspase-9活性升高,β-catenin、c-myc、cyclinD1蛋白表达减少,与正常培养的BGC823细胞相比,差异有统计学意义(P<0.05)。Wnt/β-catenin的激活剂处理可以部分逆转敲低YAP对BGC823细胞的凋亡、增殖、克隆形成能力和细胞中Caspase-3、Caspase-9活性的影响。结论 YAP敲低诱导胃癌细胞凋亡,且作用机制与抑制Wnt/β-catenin通路激活有关。
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