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[目的]构建出鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库。[方法]通过RT—PCR从人B淋巴瘤细胞Daudi的总RNA中扩增出ICOSL胞外区基因,并将此基因插入到原核表达载体pET28a中进行表达。以表达纯化的ICOSL蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾脏提取总RNA,通过RT—PCR扩增小鼠的重链可变区和Linker(VH—linker)序列,以及轻链可变区和Linker(VK—linker)序列。经重组PCR将两段基因连接起来,将VH/K与pMD19一T载体链接产物转化E.coliDH50L,PCR鉴定