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目的 构建pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒，为提高弓形虫DNA疫苗保护性做出新的探索，并期望“-／+-苗两用”。方法 采用PCR分别扩增HBsAg、GRA1；经BclI、EcoRⅠ双酶切HBsAg；EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切GRA1；BamHⅠ、XhoⅠ双酶切载体pcDNA3．0；HBsAg、GRA1、pcDNA3．0双酶切纯化产物与T4DNA连接酶在22℃连接过夜，用双酶切及双脱氧末端终止法测序鉴定重组质粒。结果 成功构建pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒。结论 为进一步研究p