非洲猪瘟病毒p30蛋白的原核表达及多抗制备

• 作 者: 黄剑 徐晶晶 程雪飞 李国新 高飞 童光志
• 机 构: 福建农林大学动物科学学院; 中国农业科学院上海兽医研究所
• 出 处: 中国动物传染病学报
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 p30基因 表达 多克隆抗体
• 基金项目: 广东省重点领域研发计划项目（2019B020211003）;国家自然科学基金专项项目(31941017)

本研究利用PCR方法扩增非洲猪瘟病毒（sy18）的结构蛋白CP204L基因(该基因序列由上海桑尼科技公司合成)，并将其克隆至原核表达载体pCold I，构建重组表达质粒pCold I-p30。并将其转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞，经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，SDS-PAGE试验结果表明，p30在大肠杆菌表达明显。纯化蛋白后，作为抗原免疫小鼠，4次免疫后，采取的血清经过间接免疫荧光和western blot检测结果表明，多克隆抗体具有明显的特异性。