Lrrc10蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备

• 作 者: 闵璐 周云雷 周煌 吴秀山 袁婺洲
• 机 构: 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心
• 出 处: 湖南师范大学自然科学学报
• 发表日期: 2011年6期
• 关键词: Lrrc10 融合蛋白 多克隆抗体 Lrrc10 fusion protein polyclonal antibody
• 基金项目: 湖南省普通高校学科带头人培养计划（湘教通2008-315）,国家精品课程（教高函2009-21）

Lrrc10是一个心脏特异表达基因．为了深入研究Lrrc10在心脏发育中的功能，需要获得Lrrc10蛋白并制备其抗体．以小鼠心脏cDNA文库为模板进行PCR扩增得到Lrrc10部分编码区序列，然后将其连接到pGEX-4T-1载体上获得原核表达载体．重组子经酶切及测序鉴定后，转化大肠杆菌（Ecoli）B121，并用IPTG诱导融合蛋白表达，GST亲和层析法亲和纯化，将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，并用Western Blot检测抗体．获得了Lrrc10原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗