大鼠脑红蛋白(NGB)可溶性原核表达和单克隆抗体制备及鉴定

• 作 者: 孙健伟 韩洪彦 徐文琳 王春丽 王航雁 徐淑玲 杨建萍 张家
• 机 构: 军事医学科学院放射医学研究所,河南省郑州市妇幼保健院,中国人民解放军总医院小儿内科
• 出 处: 中国生物化学与分子生物学报
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 大鼠 脑红蛋白 原核可溶性表达 单克隆抗体 制备与鉴定

脑红蛋白(NGB)是新发现的脑特异的携氧蛋白.为了对其功能进行深入的研究,应用已构建大鼠NGB基因编码区原核表达载体pGEX-4T-2/NGB转化的大肠杆菌BL21,获得可溶性表达产物.用谷胱甘肽S-转移酶(GST)亲和层析柱纯化后作为抗原,免疫Balb/c小鼠.通过传统的细胞融合方法制备了抗大鼠NGB的单克隆抗体,并对全部4株单抗进行了亚类和亚型、效价和特异性鉴定.为NGB结构与功能的深入研究提供了重要工具.