H9N2型禽流感病毒HA基因在昆虫／杆状病毒系统中的表达

• 作 者: 袁建琴 高斌战 宋宝敏
• 机 构: 山西农业大学生命科学学院,山西隆克尔生物制药有限公司
• 出 处: 山西农业大学学报：自然科学版
• 发表日期: 2007年1期
• 关键词: 禽流感病毒 HA基因 重组杆状病毒 表达 Avian influenza virus HA gene Recombinant baculovirus Ex
• 基金项目: 山西农业大学科技创新基金（2004060）

采用异硫氰酸胍法提取禽流感病毒分离株的SPF鸡胚尿囊毒RNA，利用RT-PCR技术扩增出禽流感病毒HA基因的cDNA．将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后，亚克隆到杆状病毒转移载体pBIueBacHis。筛选到重组质粒，测序正确后与线性化的杆状病毒DNA（Bac-NBlue^TM DNA）共转染sf9昆虫细胞，挑取蓝色蚀斑，经三轮蚀斑纯化。获得数株重组杆状病毒rpBlueBacHisH9HA。提取重组病毒DNA，经PCR证明目的基图片段已插入到杆状病毒基因蛆中，血凝实验，S