【摘 要】
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目的构建基孔肯雅病毒（chikungunya virus，CHIKV）东中南非型Ross株及该型印度洋分支LR2006株的感染性克隆。方法分别将CHIKV Ross株和LR2006株基因组分段合成，构建完整基因组的转录质粒，转录制备病毒基因组RNA，转染Vero细胞，收集培养上清，接种Vero细胞扩增病毒，用扩增的病毒感染Huh7细胞，检测病毒蛋白的表达，经滴鼻途径将106 PFU病毒接种给C57
【机 构】
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海军军医大学海军医学系生物医学防护教研室 上海市医学生物防护重点实验室 200433,海军军医大学海军医学系生物医学防护教研室 上海市医学生物防护重点实验室 200433,海军军医大学海军医学系生物医
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目的构建基孔肯雅病毒（chikungunya virus，CHIKV）东中南非型Ross株及该型印度洋分支LR2006株的感染性克隆。
方法分别将CHIKV Ross株和LR2006株基因组分段合成，构建完整基因组的转录质粒，转录制备病毒基因组RNA，转染Vero细胞，收集培养上清，接种Vero细胞扩增病毒，用扩增的病毒感染Huh7细胞，检测病毒蛋白的表达，经滴鼻途径将106 PFU病毒接种给C57BL/6小鼠，观察小鼠的体重改变以及存活情况。
结果成功构建了2株CHIKV的全长基因组转录质粒，在RNA转染Vero细胞的上清中检测到感染性CHIKV。Ross株感染的5只小鼠在6天后体重下降（P<0.05），第11天小鼠全部死亡。LR2006株感染的5只小鼠仅1只死亡，且全部小鼠体重均无明显减轻。
结论成功构建CHIKV的Ross株和LR2006株感染性克隆，Ross株对C57BL/6小鼠致病性强于LR2006株。
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