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用7L发酵罐对毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌株NB01进行了重组几丁质酶的诱导表达,通过提高通气量和调整搅拌转速,使溶氧维持在30%以上,NB01可在发酵84h内达到产酶高峰,酶活最高可达48.0795U/mL。利用中空纤维超滤膜对发酵液浓缩、提纯,再经过Sephadex G-100柱层析后得到单一组分的重组几丁质酶,酶纯度提高了7.9961倍。重组几丁质酶在60℃以下具有良好的热稳定性,在pH2 ̄6范围内有较强的耐受力,在4℃条件下贮藏具有较好的稳定性。