类风湿关节炎患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A表达及其对破骨细胞分化的影响

来源 :中华内科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hehan1127
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目的

研究类风湿关节炎(RA)患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A(Sema 5A)表达及其对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用。

方法

(1)选RA患者62例,骨关节炎(OA)患者30例,健康对照者48例,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测所有受试者血清Sema 5A水平。(2)以不同浓度Sema 5A(0、0.5、1、2.5、5 μg/ml)处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,培养7 d后行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达水平;(3)以5 μg/ml Sema 5A处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞7 d,培养基中预先加入薄骨片,显微镜下观察骨吸收陷窝个数。

结果

(1)RA患者血清Sema 5A水平显著高于健康对照者和OA患者[(5.24±0.59)μg/L比(2.93±0.34)μg/L比(2.68±0.47)μg/L,P<0.05)];抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体阳性RA患者血清Sema 5A水平显著高于抗CCP抗体阴性者(P< 0.05)。Sema 5A水平与RA患者以C反应蛋白计算的28个关节疾病活动度(DAS28-CRP)、C反应蛋白、临床疾病活动指数(CDAI)、Sharp评分呈正相关(r值分别为0.273、0.519、0.448、0.292,P<0.05);(2)随着Sema 5A浓度增加,TRAP染色阳性细胞数逐渐增多,5 μg/ml Sema 5A作用最强。Sema 5A能诱导TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达上调;(3)与空白比,5 μg/ml Sema 5A骨吸收陷窝数增多。

结论

RA患者血清Sema 5A水平显著升高,与患者的疾病活动度及骨破坏程度相关。Sema 5A可直接诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化。

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