【摘 要】
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目的建立实时细胞分析系统(RTCA)心脏毒性研究方法,并应用于药物心脏毒性的早期筛选。方法采用RTCA Cardio系统和新生1~2 d SD大鼠原代培养的心肌细胞建立体外药物心脏毒性早
【机 构】
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中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,艾森生物杭州有限公司
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目的建立实时细胞分析系统(RTCA)心脏毒性研究方法,并应用于药物心脏毒性的早期筛选。方法采用RTCA Cardio系统和新生1~2 d SD大鼠原代培养的心肌细胞建立体外药物心脏毒性早期筛选方法,并用具有抗心律失常药物奎尼丁和利多卡因,通过观察心肌细胞搏动频率、幅度和搏动节律不规则性(BRI)指数的变化,验证其评价药物的心脏毒性的效果。结果原代心肌细胞接种到RTCA Cardio E-Plate 96孔板24 h后出现心肌细胞搏动,48 h后心肌细胞搏动规律且稳定,可持续至少3 d。加入奎尼丁后迅速抑制心肌细胞的搏动,使心肌细胞的搏动频率由155±5降到0,6 h后抑制作用减弱;低浓度奎尼丁(3.1μmol·L-1)使心肌细胞搏动恢复到124±16。24 h奎尼丁浓度小于100.0μmol·L-1时,均能全部恢复细胞搏动。利多卡因加入原代心肌细胞后,心肌细胞的搏动频率、幅度、BRI的变化趋势呈明显的浓度依赖性,浓度越高,对心肌细胞的抑制作用越显著。结论 RTCA Cardio心脏毒性筛选方法可精确地检测出奎尼丁和利多卡因的心脏毒性,提示RTCA Cardio心脏毒性筛选方法可用于心脏毒性早期筛选。
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