多重PCR鉴定三种颚口线虫方法的建立

• 作 者: 李树清 李雯雯 张鸿满 陈韶红 李健 陈志飞 王巧全 张永年
• 机 构: 上海出入境检验检疫局,中山大学附属第一医院动物实验中心,广西疾病预防控制中心,中国疫病预防控制中心寄生虫病预防控制所,广西大学动物科学技术学院
• 出 处: 中国动物传染病学报
• 发表日期: 2014年6期
• 关键词: 棘颚口线虫 日本颚口线虫 杜氏颚口线虫 多重PCR 虫种鉴定 G.spinigerum G.nipponicum G.doloresi multiplex
• 基金项目: 上海市科委技术标准专项(11dz0503100),国家质检总局科技专项(2010IK013)

为了建立快速、灵敏、可靠的鉴别颚口线虫虫种的方法,根据GenBank中发表的棘颚口线虫、日本颚口线虫和杜氏颚口线虫ITS-2序列,设计了3对特异引物,建立了这3种颚口线虫的单一PCR和多重PCR检测方法,并分别对单一PCR和多重PCR方法的特异性和敏感性进行了鉴定。结果显示单一PCR和多重PCR均能特异扩增出棘颚口线虫、日本颚口线虫和杜氏颚口线虫,其片段大小分别为282、358、183 bp,单一PCR对棘颚口线虫、日本颚口线虫和杜氏颚口线虫虫体DNA最小检出量分别为0.2、0.01、0.01 ng/μL