利用CRISPR/Cas系统快速高效构建血友病乙小鼠模型

• 作 者: 汪启翰 怀聪 孙瑞林 庄华 陈红岩 费俭 卢大儒
• 机 构: 复旦大学生命科学学院,上海南方模式生物研究中心
• 出 处: 遗传
• 发表日期: 2015年11期
• 关键词: 血友病乙 CRISPR/Cas系统 基因组编辑 小鼠模型 hemophilia B CRISPR/Cas system genome editing mo

血友病乙是由凝血因子Ⅸ（FactorⅨ,FⅨ）缺乏或功能缺陷导致的出血性疾病,为伴X染色体隐性遗传病。小鼠模型对于血友病乙的研究具有十分重要的意义,而基因组编辑技术又为小鼠模型的构建提供了一种快捷而且高效的途径。本文利用CRISPR/Cas系统,在小鼠FⅨ基因第8外显子上选择靶位点,将Cas9 m RNA和带有靶位点的sg RNA显微注射到C57BL/6品系小鼠的受精卵中,获得基因修饰的小鼠。利用高分辨率熔解曲线分析（High resolution melting,HRM）技术进行精确基因分型,并通过测序