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【摘要】 目的 探讨化学发光法检测的乙型病毒肝炎患者血清HBsAg的水平与乙型肝炎病毒前s1蛋白（Pre-S1）的相关性。方法 分别用化学发光法检测2015年1月-12月本院乙型病毒性肝炎患者血清中HBsAg水平，酶联免疫吸附法（ELISA）检测这些患者血清中的Pre-S1，探讨血清HBsAg值高低与Pre-S1阳性率的关系。结果 共收集HBsAg≥0.5ng/ml标本824例，血清HBsAg≥165ng/ml患者387例，其中Pre-S1阳性252例；血清100ng/ml≤HBsAg<165ng/ml患者120例，其中Pre-S1阳性45例；血清50ng/ml≤HBsAg<100ng/ml患者112例，其中Pre-S1阳性21例；血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml患者205例，其中Pre-S1阳性23例。结论 血清中HBsAg值与Pre-S1阳性率呈正相关，p<0.05有统计学意义。化学发光定量检测血清中HBsAg值对于临床判断乙型病毒肝炎患者病毒水平及复制情况有一定的意义。
【关键词】 化学发光法 乙型病毒肝炎 HBsAg Pre-S1
乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）感染在许多国家是一个重大的公共卫生问题，全世界有近3亿人携带乙肝病毒，每年约有100万人死于肝硬化和肝癌[1]。我国是乙型肝炎病毒的高发流行区域，卫生部在2006 年开展了全国人群乙型肝炎等有关疾病血清流行病学调查，成人HBV感染率高达42.40% ～80.77%，人群HBsAg 携带率为7.18%[2]。
实验室通常采用ELISA技术检测乙型肝炎病毒血清免疫学标志物（HBV-M），随着科学技术的发展，越来越多的实验室使用化学发光技术来定量检测HBV-M，该技术具有灵敏度高、特异性强、方法稳定快速、自动化程度高等优点。pre-S1为乙型肝炎病毒外膜蛋白的重要组成部分，它含有肝细胞膜受体，在乙肝病毒感染肝细胞和机体免疫应答方面起重要作用。目前有研究认为pre-S1测定可作为反映HBV 复制和传染性的指标，其持续存在提示了体内有处于复制状态的 HBV 颗粒 [3]。本文通过化学发光法检测乙型病毒性肝炎患者血清中HBsAg水平，ELISA法检测血清中pre-S1，两者进行比对分析，探讨乙肝HBsAg定量检测的临床意义。
1 材料与方法
标本来源 收集我院2015年1月-12月住院患者HBsAg≥0.5ng/ml血清标本824例，其中男性438例，女性386例。
仪器与试剂 化学发光免疫分析法采用北京科美生物技术有限公司化学发光免疫分析仪，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）测定试剂盒由北京科美提供，标本检测结果≥0.5 ng/ml时判断为阳性。Pre-S1检测试剂盒由英科新创（厦门）科技有限公司提供。血清标本严格按说明书操作检测。
统计学方法 应用SPSS17.0统计软件，采用趋势卡方检验对数据进行统计分析，P<0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 HBsAg的含量及Pre-S1的检测结果如下（表1）
2.2 BsAg的含量与Pre-S1阳性率相关性分析
使用SPSS17.0软件对数据进行分析，Gamma=0.713，p<0.05为差异有统计学意义，血清中HBsAg的含量与Pre-S1阳性率二者成正相关。
3 讨论
乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种严重危害人群健的传染性疾病，HBV 可以通过母婴、性传播、血液等方式传播。临床上主要通过检测HBV-M和 HBV-DNA 作为 HBV 的检测项目， HBV-DNA 检测被认为HBV 感染和复制的金标准，但由于 HBV DNA 检测对实验场所以及试验设备有较高的要求，因此无法在基层医院开展。
ELISA 法检测乙肝病毒的血清标志物HBV-M是目前临床最为常用的检测项目，主要应用于确定受检者是否感染了HBV，但因其是一种定性检测，不能确切地反映乙肝患者血清 HBV 含量和 HBV 在体内的复制状况。化学发光技术检测法是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法，能对血清中HBV-M进行定量检测。HBsAg作为一个最早的乙型肝炎诊断指标，其定量检测使临床应用价值得到极大拓展。
Pre-S1主要存在于Dane颗粒表面，是肝细胞特异的无涎糖蛋白受体，有高度活跃的细胞内吞饮功能。其氨基酸的21-47 肽段可以与宿主肝细胞膜上的相应受体结合，介导 HBV 侵入肝细胞。近年来 ，Pre-S1作为乙肝患者血清学新标志物，逐渐显示出较高的临床应用价值。有学者认为ELISA试剂检测Pre-S1诊断HBV复制特异度高，误诊率低，与HBV-DNA有高度一致性[4]。普遍研究认为，Pre-S1与HBV-DNA高度相关，可作为反映HBV复制和感染的指标，能更完善传统的乙肝病毒血清标志物体系，在 HBeAg检测阴性时可作为很好的补充项目[5-7]。
本研究结果显示乙肝患者血清中HBsAg水平与Pre-S1阳性率正相关：血清HBsAg≥165ng/ml时，Pre-S1阳性率高达65.1%；随着HBsAg水平的下降，Pre-S1阳性率明显降低，血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml，Pre-S1阳性率为11.2%。而在血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml，Pre-S1阳性的23例标本中，有19例标本为HBeAg≥0.4NCU/ml，说明血清中HBsAg浓度虽然比较低，但是当HBeAg为阳性时血液中的HBV病毒仍然可能处于活跃的复制状态。
综上所述，相对于传统的ELISA检测方法，化学发光定量检测法具有快速、准确、自动化程度高等优点。对于条件有限不能开展HBV DNA检测的基层医院，定量检测患者血清HBsAg水平，结合其他HBV-M指标、Pre-S1检测，在乙肝患者的临床病情诊断和疗效观察中有良好的应用价值。
参考文献
[1] Nicola Coppola， Lorenzo Onorato， Carmine Minichini， Giovanni Di Caprio，Mario Starace， Caterina Sagnelli， Evangelista Sagnelli.Clinical significance of hepatitis B surface antigen mutants. World J Hepatol 2015，7（27）： 2729-2739
[2] 胡晓丽，赵宏伟，吴晓岩，牛俊奇.乙型肝炎病毒感染的流行现状. 临床肝胆病杂志，2012 ，28（6）：413-416
[3] 闵福援，孙桂珍，王健，辛永梅.前Sl杭原在乙型肝炎诊断及判断预后中的作用.中华检验医学杂志， 2004， 27（4）： 224-226
[4] 王晓存，唐婧，吴军. ELISA试剂检测前S1抗原诊断乙型肝炎病毒复制价值的Meta分析. 中国循证医学杂志，2014，14（11）：1318-1325
[5] 陈永刚，肇玉博，杨文涛. HBV血清标志物联合 Pre-S1 抗原或 HBV DNA检测的临床价值. 现代中西医结合杂志，2014，23（10）：1116-1117
[6] 曾繁钰，蒋冰，谭璐. Pre-S1抗原与HBV血清学标志物和HBV DNA的相关性及临床意义. 武汉大学学报，2014，35（1）：85-88
[7] 张菊英，张亚衡. 920例乙型肝炎患者病毒前s1抗原检测的临床价值探讨. 检验医学与临床，2014，11（2）：246-248
【关键词】 化学发光法 乙型病毒肝炎 HBsAg Pre-S1
乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）感染在许多国家是一个重大的公共卫生问题，全世界有近3亿人携带乙肝病毒，每年约有100万人死于肝硬化和肝癌[1]。我国是乙型肝炎病毒的高发流行区域，卫生部在2006 年开展了全国人群乙型肝炎等有关疾病血清流行病学调查，成人HBV感染率高达42.40% ～80.77%，人群HBsAg 携带率为7.18%[2]。
实验室通常采用ELISA技术检测乙型肝炎病毒血清免疫学标志物（HBV-M），随着科学技术的发展，越来越多的实验室使用化学发光技术来定量检测HBV-M，该技术具有灵敏度高、特异性强、方法稳定快速、自动化程度高等优点。pre-S1为乙型肝炎病毒外膜蛋白的重要组成部分，它含有肝细胞膜受体，在乙肝病毒感染肝细胞和机体免疫应答方面起重要作用。目前有研究认为pre-S1测定可作为反映HBV 复制和传染性的指标，其持续存在提示了体内有处于复制状态的 HBV 颗粒 [3]。本文通过化学发光法检测乙型病毒性肝炎患者血清中HBsAg水平，ELISA法检测血清中pre-S1，两者进行比对分析，探讨乙肝HBsAg定量检测的临床意义。
1 材料与方法
标本来源 收集我院2015年1月-12月住院患者HBsAg≥0.5ng/ml血清标本824例，其中男性438例，女性386例。
仪器与试剂 化学发光免疫分析法采用北京科美生物技术有限公司化学发光免疫分析仪，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）测定试剂盒由北京科美提供，标本检测结果≥0.5 ng/ml时判断为阳性。Pre-S1检测试剂盒由英科新创（厦门）科技有限公司提供。血清标本严格按说明书操作检测。
统计学方法 应用SPSS17.0统计软件，采用趋势卡方检验对数据进行统计分析，P<0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 HBsAg的含量及Pre-S1的检测结果如下（表1）
2.2 BsAg的含量与Pre-S1阳性率相关性分析
使用SPSS17.0软件对数据进行分析，Gamma=0.713，p<0.05为差异有统计学意义，血清中HBsAg的含量与Pre-S1阳性率二者成正相关。
3 讨论
乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种严重危害人群健的传染性疾病，HBV 可以通过母婴、性传播、血液等方式传播。临床上主要通过检测HBV-M和 HBV-DNA 作为 HBV 的检测项目， HBV-DNA 检测被认为HBV 感染和复制的金标准，但由于 HBV DNA 检测对实验场所以及试验设备有较高的要求，因此无法在基层医院开展。
ELISA 法检测乙肝病毒的血清标志物HBV-M是目前临床最为常用的检测项目，主要应用于确定受检者是否感染了HBV，但因其是一种定性检测，不能确切地反映乙肝患者血清 HBV 含量和 HBV 在体内的复制状况。化学发光技术检测法是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法，能对血清中HBV-M进行定量检测。HBsAg作为一个最早的乙型肝炎诊断指标，其定量检测使临床应用价值得到极大拓展。
Pre-S1主要存在于Dane颗粒表面，是肝细胞特异的无涎糖蛋白受体，有高度活跃的细胞内吞饮功能。其氨基酸的21-47 肽段可以与宿主肝细胞膜上的相应受体结合，介导 HBV 侵入肝细胞。近年来 ，Pre-S1作为乙肝患者血清学新标志物，逐渐显示出较高的临床应用价值。有学者认为ELISA试剂检测Pre-S1诊断HBV复制特异度高，误诊率低，与HBV-DNA有高度一致性[4]。普遍研究认为，Pre-S1与HBV-DNA高度相关，可作为反映HBV复制和感染的指标，能更完善传统的乙肝病毒血清标志物体系，在 HBeAg检测阴性时可作为很好的补充项目[5-7]。
本研究结果显示乙肝患者血清中HBsAg水平与Pre-S1阳性率正相关：血清HBsAg≥165ng/ml时，Pre-S1阳性率高达65.1%；随着HBsAg水平的下降，Pre-S1阳性率明显降低，血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml，Pre-S1阳性率为11.2%。而在血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml，Pre-S1阳性的23例标本中，有19例标本为HBeAg≥0.4NCU/ml，说明血清中HBsAg浓度虽然比较低，但是当HBeAg为阳性时血液中的HBV病毒仍然可能处于活跃的复制状态。
综上所述，相对于传统的ELISA检测方法，化学发光定量检测法具有快速、准确、自动化程度高等优点。对于条件有限不能开展HBV DNA检测的基层医院，定量检测患者血清HBsAg水平，结合其他HBV-M指标、Pre-S1检测，在乙肝患者的临床病情诊断和疗效观察中有良好的应用价值。
参考文献
[1] Nicola Coppola， Lorenzo Onorato， Carmine Minichini， Giovanni Di Caprio，Mario Starace， Caterina Sagnelli， Evangelista Sagnelli.Clinical significance of hepatitis B surface antigen mutants. World J Hepatol 2015，7（27）： 2729-2739
[2] 胡晓丽，赵宏伟，吴晓岩，牛俊奇.乙型肝炎病毒感染的流行现状. 临床肝胆病杂志，2012 ，28（6）：413-416
[3] 闵福援，孙桂珍，王健，辛永梅.前Sl杭原在乙型肝炎诊断及判断预后中的作用.中华检验医学杂志， 2004， 27（4）： 224-226
[4] 王晓存，唐婧，吴军. ELISA试剂检测前S1抗原诊断乙型肝炎病毒复制价值的Meta分析. 中国循证医学杂志，2014，14（11）：1318-1325
[5] 陈永刚，肇玉博，杨文涛. HBV血清标志物联合 Pre-S1 抗原或 HBV DNA检测的临床价值. 现代中西医结合杂志，2014，23（10）：1116-1117
[6] 曾繁钰，蒋冰，谭璐. Pre-S1抗原与HBV血清学标志物和HBV DNA的相关性及临床意义. 武汉大学学报，2014，35（1）：85-88
[7] 张菊英，张亚衡. 920例乙型肝炎患者病毒前s1抗原检测的临床价值探讨. 检验医学与临床，2014，11（2）：246-248