利用CHO（dhfr^—）细胞高效表达GM—CSF／Feγ2^—融合蛋白

• 作 者: 宁金鹰 王尊荣 等
• 机 构: 济宁医学院组织学与胚胎学教研室,神经病学教研室
• 出 处: 济宁医学院学报
• 发表日期: 2001年1期
• 关键词: 融合蛋白 基因表达 细胞CHO GM-CSF/Feγ2^- Fusion proteinCHO-dhfr-cellTansfectionGene express

目的 利用二氢叶酸还原酶缺陷型细胞CHO（dhfr-)高效表达融合蛋白GM－CSF／Feγ2^-。方法 利用脂质体基因转染技术，把含有融合基因GM－CSF／Feγ2^-的真核表达质粒pRc/CMV2/GM-CSF/Feγ2^-和含有二氢叶酸还原酶基因的真核表达质粒pSV2-dhfr共转洒二氢叶酸还原酶缺陷型细胞CHO（dhfr-)中。用G418和撤除H、T（次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷)双筛选，获得dhfr+neo+双表型阳性的细胞克隆。取表达产量最高的克隆进行亚克隆，并行MTX加压筛选，以提高表达量。用R