肠癌SW620和SW480细胞高表达Smad4的作用及机制

• 作 者: 刘中财 严威 林福生 林素琼 杨文超 陆树 顾姣姣 王源源 吴国洋
• 机 构: 361004 厦门大学附属中山医院普通外科二病区,361004 厦门大学附属中山医院普通外科二病区,361004 厦门大学附属中山医院普通外科二病区,361004 厦门大学附属中山医院普通外科二病区,
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2018年35期
• 关键词: 结直肠癌 上皮-间充质转化 转化生长因子-β1 Smad4 Eph受体酪氨酸激酶A2

目的

探讨SW620和SW480细胞株中高表达Smad4后迁移及侵袭力的变化及作用机制。

方法

利用Western blot从肠癌细胞系SW620、SW480、RKO/HCT-116、LoVo、HCT-8中筛选出符合实验要求的细胞株。慢病毒载体构建稳定表达Smad4的细胞株，并通过Western blot检验构建效果。利用Western blot检测上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化Eph受体酪氨酸激酶A2(p-EphA2)表达，Transwell检测迁移和侵袭力的变化。

结果

SW620和SW480低表达Smad4和高表达转化生长因子-β受体(TGF-βR)Ⅰ/Ⅱ，高表达EphA2，SW480和SW620细胞高表达Smad4后明显表现出上皮细胞的特性，E-cadherin表达明显升高，Vimentin表达降低，但MMP-9在SW620无明显改变，在转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激下，E-cadherin、Vimentin、MMP-9表达没有明显的改变；Smad4高表达阻止癌细胞迁移(SW480：V/S＝75.00±15.90/38.60±11.80，P＝0.001，SW620：V/S＝71.20±17.56/32.80±8.90, P＝0.002)和侵袭(SW480：V/S＝102.20±8.90/43.20±8.80，P＝0.001、SW620：V/S＝101.40±11.60/43.00±6.73，P＝0.004)，但TGF-β1对迁移(SW480：S/TS＝38.60±11.80/32.80±19.79，P＝0.648、SW620：S/TS＝32.20±8.90/28.60±15.90，P＝0.0.529)和侵袭(SW480：S/TS＝43.00±8.80/37.00±7.68，P＝0.360、SW620：S/TS＝43.60±6.73/40.40±8.52，P＝0.679)无影响。

结论

Smad4通过阻断磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/EphA2轴线，减弱癌细胞的迁移及侵袭力。