人类精子冷冻复苏后乌头酸水合酶的表达变化及其致损伤机制

• 作 者: 王尚乾 唐敏 徐杨 王巍 孙红勇 张炜
• 机 构: 210029南京医科大学第一附属医院泌尿外科,210029南京医科大学第一附属医院泌尿外科,210029南京医科大学第一附属医院泌尿外科,210029南京医科大学第一附属医院泌尿外科,210029南京
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2013年30期
• 关键词: 精子 人类 冷冻 复苏 乌头酸水合酶 损伤

目的 探讨乌头酸水合酶(AGO2)在人类精子冷冻复苏前后的表达变化及其致精子功能损伤机制.方法 利用计算机精液分析系统(CASA)分析15例冷冻前后人类精子的活力;提取人类冷冻前后精子的总蛋白进行Western blot分析ACO2的含量变化;分析并且进行免疫荧光染色定位ACO2在精子的表达区域;利用化学发光法检测冷冻前后精子三磷酸腺苷(ATP)含量的变化;通过荧光探针JC-1对线粒体鞘染色结果的不同进行线粒体膜电势的检测,同时采用流式细胞仪直接对红色荧光(R1)与绿色荧光(R2)定量分析,比较两组差异.结果 与冷冻前组比较,冻后复苏组的精子活力下降了18％,ATP含量下降了32％,线粒体R1的比例下降了27％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 AC02作为线粒体蛋白在冷冻复苏后发生了蛋白的降解,线粒体的功能受到了损伤,使得ATP的产量下降,导致了精子运动能力缺失。