核转录因子Κb涉及水通道蛋白-4抗体阳性血清对星形胶质细胞的毒性作用

来源 :中国神经免疫学和神经病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wjq12262024
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目的 探讨核转录因子 κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)抗体诱导的星形胶质细胞损伤中的作用.方法 纯化培养新生SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,按随机数字表法分为对照组 、吡咯醛二硫氨基甲酸(PDTC)组 、AQP4抗体阳性血清组(AQP4抗体组)和AQP4抗体+PDTC组,其中对照组加入10%(体积分数)健康人血清,PDTC组给予10μmol/L PDTC预处理1 h后加入等量健康人血清;抗体组加入AQP4抗体阳性血清;AQP4抗体+PDTC组先用PDTC预处理1 h后再加入AQP4抗体阳性血清.细胞培养12 h后采用免疫细胞化学荧光法观察各组NF-κB p65入核情况,MTS比色法检测细胞存活度,免疫印迹法检测细胞内p65蛋白 、磷酸化p65(p-p65)蛋白的表达.结果 AQP4抗体组可见明显NF-κB p65入核,其余三组均未见明显入核;AQP4抗体+PDTC组细胞存活度高于AQP4抗体组(吸光度值分别为0.4380±0.005、0.3897±0.045,F=133.355,P0.05);AQP4抗体+PDTC组p-p65蛋白表达水平较AQP4抗体组明显减少(分别为0.7027±0.020,0.8197±0.027,F=10.794,P<0.05).结论 AQP4抗体阳性血清可能通过激活NF-κB途径促进星形胶质细胞损伤,抑制NF-κB活性对星形胶质细胞具有保护作用.
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