【摘 要】
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提取经重金属胁迫处理的水稻幼苗总RNA并纯化mRNA，采用SMART技术反转录成cDNA，利用Gateway技术将cDNA构建到入门载体pDONR222后，再经LR反应重组到酵母表达载体pYES2-DEST52上，获
【机 构】
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中国科学院华南植物园/中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室,中国科学院研究生院
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提取经重金属胁迫处理的水稻幼苗总RNA并纯化mRNA，采用SMART技术反转录成cDNA，利用Gateway技术将cDNA构建到入门载体pDONR222后，再经LR反应重组到酵母表达载体pYES2-DEST52上，获得水稻cDNA表达文库。检测表明．所构建的cDNA文库能达到后续试验要求。使用重金属镉敏感酵母突变株ycfl△进行水稻中重金属镉耐受相关基因筛选，获得多个可以恢复表型的酵母单克隆。提取质粒并测序分析后可知涉及到水通道蛋白、蛋白酶抑制剂以及金属硫蛋白等不同基因，筛选所得基因即为水稻应答重金属镉胁
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