【摘 要】
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为建立一种快速检测兽用生物制品中支原体污染的方法,试验根据GenBank上登录的支原体16S rRNA种属保守区序列设计1对引物,经PCR条件优化,建立了检测兽用生物制品中支原体污染
【机 构】
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兰州中农威特生物科技股份有限公司;
【基金项目】
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甘肃省科技重大专项计划项目(143NKDA029);兰州市科技局项目(2012-2-84)
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为建立一种快速检测兽用生物制品中支原体污染的方法,试验根据GenBank上登录的支原体16S rRNA种属保守区序列设计1对引物,经PCR条件优化,建立了检测兽用生物制品中支原体污染的PCR方法。结果表明:该方法对大肠杆菌、沙门氏杆菌、巴氏杆菌、猪链球菌、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、新城疫病毒的扩增结果均为阴性;对鸡毒支原体、猪肺炎支原体、禽滑液支原体基因组DNA的检测灵敏度分别达到0.13,0.88,0.14 ng,与培养法的符合率达98.84%;应用该方法对鸡胚、血清、细胞等140份临床样品进行支原体污染的检测,阳性污染率达6.43%。表明PCR方法检测具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性,可用于兽用生物制品生产中鸡胚、血清、细胞、疫苗半成品等的质量控制和疫苗的质量检验。
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