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哈维氏弧菌是引起大黄鱼疾病的主要致病菌之一，胞外蛋白酶是哈维氏弧菌GYC1108．1的主要致病因子。利用表型克隆技术，用Sau3A Ⅰ将提取的哈维氏弧菌基因组DNA酶切成短片段，纯化回收1—5kb的片段与BamH Ⅰ酶切的pUC118在T4连接酶的作用下进行连接，并转化感受态细胞TGl，在含0．5％脱脂奶和100μg／mL氨苄青霉素的LB平板上筛选胞外蛋白酶阳性株，命名为YZ。测定阳性株Yz的胞外蛋白酶活性，并对阳性株的重组质粒的插入片段进行序列测定，分析开放阅读框，确定胞外蛋白酶基因编码区。发现蛋白酶基