人肝再生增强因子小干扰RNA表达质粒的构建和鉴定

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ak328
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目的 检测人肝癌细胞株HepG2细胞有无人肝再生增强因子(hALR)的表达,构建针对人肝再生增强因子基因编码区的小干扰RNA(siRNA)表达质粒pSIALR-A及其阴性对照质粒pSIALR-B,观察其对人肝再生增强因子表达的影响.方法用免疫细胞化学法观察HepG2细胞表达hALR的情况.将构建成功的pSIALR-A和pSIALR-B分别转染HepG2细胞,转染后48 h,用免疫细胞化学法及逆转录聚合酶链反应法观察人肝再生增强因子蛋白及mRNA的表达.结果 HepG2细胞有人肝再生增强因子的表达.成功构建了针对人肝再生增强因子基因编码区的siRNA表达质粒pSIALR-A,并发现它能明显抑制人肝再生增强因子的表达,而随机序列的siRNA却无此作用.结论人肝再生增强因子的siRNA具有明显和特异性的抑制人肝再生增强因子的表达作用。

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