论文部分内容阅读
目的 探讨黄芩苷对于长波紫外线(UVA)照射导致人皮肤成纤维细胞衰老的保护作用及对端粒途径的影响。方法 分离培养人原代成纤维细胞，将亚融合状态的培养细胞分为空白组、黄芩苷组、UVA组和UVA+黄芩苷组，照光组中以10 J/cm2 UVA进行照射，药物干预组中加入50 μg/ml黄芩苷干预处理。以流式细胞仪测定细胞周期变化；以端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)检测细胞端粒酶水平；以实时定量PCR法检测细胞端粒长度及衰老相关基因p53、p16和c-myc mRNA水平；以蛋白印迹法检测p16和c-myc蛋白水平。结果 UVA引起显著G1期阻滞，G1期细胞比值由正常对照组59.94％升高至81.04％，而黄芩苷处理后G1期细胞比值下降为65.55％。UVA照射后细胞端粒长度缩短为正常组的31.2％，黄芩苷干预组的端粒长度可恢复至正常细胞的63.9％。此外与正常组相比，UVA诱导p53和p16 mRNA表达水平升高为2.93±0.21和2.14±0.09，而c-myc mRNA水平下降为0.53±0.03;黄芩苷干预可抑制上述改变。照射后与正常组相比，p16蛋白水平增高为5.84±0.16，c-myc蛋白表达降低为0.35±0.04；黄芩苷处理后p16蛋白表达量下降为4.09±0.13(P＜ 0.05)；c-myc蛋白表达水平无明显变化(P＞0.05)。正常对照和UVA组的端粒酶活性为阴性，加入黄芩苷对端粒酶活性无影响。结论 黄芩苷可延缓人成纤维细胞光老化进程，其机制可能与调控p53等老化相关基因表达有关，与端粒酶活性无关。