【摘 要】
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目的观察凝血酶致敏蛋白2(THBS2)对前列腺癌细胞增殖能力的影响以及抑癌基因p53对THBS2的调控能力。方法以Lipofectamine 2000试剂转染针对p53和非特异性对照组的小干扰RNA(siRNA),干扰前列腺癌细胞C4-2中p53的表达,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测细胞内THBS2的mRNA和蛋白水平表达变化;采用质粒转染的方
【机 构】
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130031 长春,吉林大学中日联谊医院泌尿外科,130021 长春,吉林大学第一医院肿瘤中心,130031 长春,吉林大学中日联谊医院骨科,130031 长春,吉林大学中日联谊医院泌尿外科
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目的观察凝血酶致敏蛋白2(THBS2)对前列腺癌细胞增殖能力的影响以及抑癌基因p53对THBS2的调控能力。
方法以Lipofectamine 2000试剂转染针对p53和非特异性对照组的小干扰RNA(siRNA),干扰前列腺癌细胞C4-2中p53的表达,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测细胞内THBS2的mRNA和蛋白水平表达变化;采用质粒转染的方法在293T细胞中过表达p53后检测THBS2蛋白水平的变化,明确p53对THBS2表达的影响;采用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法计算并检测干扰或过表达THBS2表达后对前列腺癌细胞增殖能力的影响,明确THBS2对前列腺癌细胞增殖的调节能力。
结果干扰p53表达后细胞内THBS2 mRNA的表达明显升高,说明p53可以调节THBS2的转录水平,进一步检测干扰p53表达后,THBS2的蛋白水平表达明显升高;在细胞内,过表达p53后检测THBS2的蛋白表达水平明显下降;在C4-2细胞中干扰目标基因THBS2的表达后,增殖细胞的百分比从(19.7±1.6)%下降至(13.2±0.9)% (P=0.000)。同时,在C4-2细胞中过表达THBS2后,增殖细胞的百分比从(19.2±1.5)%上升至(36.0±1.3)% (P=0.011)。
结论在前列腺癌细胞中,p53可以在mRNA和蛋白水平调节THBS2的表达,THBS2具有调节前列腺癌细胞增殖的能力。
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