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摘 要:目的:通过选择1种溶剂来同时提取单身药材当中的脂溶性成分以及水溶性成分,从而使得丹参药材提取工艺的成本投入得到有效的控制。方法:使用正交试验设计的方式,选择乙醇浓度、溶剂倍数、提取时间以及提取次数这几个要素对其进行全面的研究,将丹参当中丹参酮IIA和丹酚酸B这两个指标成分,在研究的过程中考察同时确立了丹参乙醇回流提取的工艺。结果:在丹参药材提取的过程中,如果我们比较重视丹参酮IIA的提取工作,我们最好采用85%乙醇提取,加入12倍量的水,提取的次数为2次,每一次提取的时间为2个小时。如果兼顾丹参酮IIA和丹酚酸B,我们可以采取的是75%乙醇提取,加入10倍的水,提取的次数为2次,每次提取的时间为1.5h,也可以选择75%的乙醇提取加入12倍的水,共提取3次,每次提取的时间为两个小时。结论:在生产的过程中使用全新的工艺能够兼顾提取丹参药材当中的脂溶性物质和水溶性物质,在应用的过程中节省时间,同时还能较少能源的消耗。
关键词:丹参;丹参酮IIA;丹酚酸B;提取工艺
丹参中的主要成分有两种,一种是以丹参酮IIA为代表物质的脂溶性成分,另一个是以丹酚酸B为代表物质的水溶性成分,在丹参生产的过程中,我们通常采用醇提和水提有机结合的方式对丹参当中的药材进行提取处理。
1、仪器和试药
Agilent1100高效液相色谱仪,Agilent1100化学工作站(美国惠普);UV-2000紫外-可见分光光度计(日本日立);CX-300型超声波清洗器(北京医疗设备厂);DZ-2BC型真空干燥箱(天津泰斯特);电子天平(北京分析仪器厂)。乙腈(美国FISHER公司,色谱纯);水(娃哈哈纯净水);乙醇(北京化学试剂公司,分析纯);甲醇(北京化工厂,分析纯、色谱纯)。丹参药材购于河北安国以岭中药饮片有限公司,经本实验室杜守颖教授鉴定为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的根及根茎药材,批号为070701。丹参对照品购自中国药品生物制品检定所,批号110736-200829。
2、方法和结果
2.1丹参酮IIA的含量测定
测定的过程中我们采用的是高效液相色谱仪对其进行处理,流动相是甲醇:水(87:13),流速是1ml/min,检测的波长为270mm,其柱温设定为室温水平。
精密的称取适量样品,样品大约相当于0.1g的干浸膏,将其放置在容积为50ml的容量瓶当中,加入100%的乙醇定容,之用滤膜滤过,就可以完成进样处理,其结果如表1所示:
从上述的研究当中我们可以看到A因素、B因素C因素、D因素都有非常显著的影响,A因素当中,A3的影响最小,所以我们选择A3,B因素当中B3的影响最大,所以选择B3在C因素当中C3的影响最大,所以选择C3,在D因素当中,D2的影响最大,所以选择D2。
2.2 丹酚酸B的含量测定
用高效液相色谱仪测定,流动相为甲醇∶乙腈∶甲酸∶水=30∶10∶1∶59,流速为1mL/min,检测波长为286nm,柱温为室温。精密称取样品干浸膏约0.1g,置于50mL容量瓶中,精密加入50%甲醇,超声处理2min,再用50%甲醇定容,滤膜滤过,取滤液,即可进样。结果见表2。
由表2的结果表明:A因素(乙醇浓度)、B因素(溶剂倍数)、C因素(提取时间)、D因素(提取次数),均具有极显著性影响(P<0.0001)。A因素中,A1>A2>A3,故选择A3;B因素中,B3>B2>B1,故选择B3;C因素中,C3>C1>C2,故选择C3;D因素中,D2>D3>D1,故选择D2。
丹酚酸B最终选择的最佳提取工艺为A1B3C3D2,即为75%乙醇,用12倍量,回流提取2次,每次2h。
2.3 权重法确定最佳提取工艺
综合考虑丹参酮ⅡA和丹酚酸B两个指标,乙醇浓度这一因素不统一,借鉴数理统计学的研究思路,将丹参酮ⅡA和丹酚酸B二个因素相结合起来确定指标权重并进行综合评价,得出的指标权重准确可靠,从而确定最佳提取工艺。
将丹参酮ⅡA和丹酚酸B二个指标中测得的最大的数字定为100分,其他数字与最大值的比值大小计算得分。根据要求,丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量越大越好,2个因素同等重要,确定其权重系数均为50%,计算总得分,以此分数为基础,选择分值最大的方法。综合评分=(丹参酮ⅡA百分含量×0.5)/0.237+(丹酚酸B百分含量×0.5)/4.332。结果见表3。
由表3可知,综合评分值最高为6号,即85%乙醇提取为最佳醇浓度。丹参药材最佳提取工艺为:85%乙醇提取,加水12倍量,提取2次,每次2h。仅次于最高得分的工艺分别是3号和2号,其中丹酚酸B所占总分的比重均大于6号工艺,且丹参酮ⅡA的提取含量也较高,但小于6号工艺。因此实际生产应用中,如果侧重于对丹参药材中丹参酮ⅡA的提取,可以采取6号工艺;如果兼顾丹参酮ⅡA和丹酚酸B,可以采取2号或3号工艺。
3、结论
本试验研究的工艺不仅可以根据实际生产的需要改变工藝条件,还可望为后续工作大孔树脂纯化节省成本。
参考文献:
[1]王海华.复方丹参片的稳定性分析[J].广西中医学院学报.2005(03)
[2]叶勇.丹参有效成分分离的研究进展[J].药品评价.2005(02)
关键词:丹参;丹参酮IIA;丹酚酸B;提取工艺
丹参中的主要成分有两种,一种是以丹参酮IIA为代表物质的脂溶性成分,另一个是以丹酚酸B为代表物质的水溶性成分,在丹参生产的过程中,我们通常采用醇提和水提有机结合的方式对丹参当中的药材进行提取处理。
1、仪器和试药
Agilent1100高效液相色谱仪,Agilent1100化学工作站(美国惠普);UV-2000紫外-可见分光光度计(日本日立);CX-300型超声波清洗器(北京医疗设备厂);DZ-2BC型真空干燥箱(天津泰斯特);电子天平(北京分析仪器厂)。乙腈(美国FISHER公司,色谱纯);水(娃哈哈纯净水);乙醇(北京化学试剂公司,分析纯);甲醇(北京化工厂,分析纯、色谱纯)。丹参药材购于河北安国以岭中药饮片有限公司,经本实验室杜守颖教授鉴定为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的根及根茎药材,批号为070701。丹参对照品购自中国药品生物制品检定所,批号110736-200829。
2、方法和结果
2.1丹参酮IIA的含量测定
测定的过程中我们采用的是高效液相色谱仪对其进行处理,流动相是甲醇:水(87:13),流速是1ml/min,检测的波长为270mm,其柱温设定为室温水平。
精密的称取适量样品,样品大约相当于0.1g的干浸膏,将其放置在容积为50ml的容量瓶当中,加入100%的乙醇定容,之用滤膜滤过,就可以完成进样处理,其结果如表1所示:
从上述的研究当中我们可以看到A因素、B因素C因素、D因素都有非常显著的影响,A因素当中,A3的影响最小,所以我们选择A3,B因素当中B3的影响最大,所以选择B3在C因素当中C3的影响最大,所以选择C3,在D因素当中,D2的影响最大,所以选择D2。
2.2 丹酚酸B的含量测定
用高效液相色谱仪测定,流动相为甲醇∶乙腈∶甲酸∶水=30∶10∶1∶59,流速为1mL/min,检测波长为286nm,柱温为室温。精密称取样品干浸膏约0.1g,置于50mL容量瓶中,精密加入50%甲醇,超声处理2min,再用50%甲醇定容,滤膜滤过,取滤液,即可进样。结果见表2。
由表2的结果表明:A因素(乙醇浓度)、B因素(溶剂倍数)、C因素(提取时间)、D因素(提取次数),均具有极显著性影响(P<0.0001)。A因素中,A1>A2>A3,故选择A3;B因素中,B3>B2>B1,故选择B3;C因素中,C3>C1>C2,故选择C3;D因素中,D2>D3>D1,故选择D2。
丹酚酸B最终选择的最佳提取工艺为A1B3C3D2,即为75%乙醇,用12倍量,回流提取2次,每次2h。
2.3 权重法确定最佳提取工艺
综合考虑丹参酮ⅡA和丹酚酸B两个指标,乙醇浓度这一因素不统一,借鉴数理统计学的研究思路,将丹参酮ⅡA和丹酚酸B二个因素相结合起来确定指标权重并进行综合评价,得出的指标权重准确可靠,从而确定最佳提取工艺。
将丹参酮ⅡA和丹酚酸B二个指标中测得的最大的数字定为100分,其他数字与最大值的比值大小计算得分。根据要求,丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量越大越好,2个因素同等重要,确定其权重系数均为50%,计算总得分,以此分数为基础,选择分值最大的方法。综合评分=(丹参酮ⅡA百分含量×0.5)/0.237+(丹酚酸B百分含量×0.5)/4.332。结果见表3。
由表3可知,综合评分值最高为6号,即85%乙醇提取为最佳醇浓度。丹参药材最佳提取工艺为:85%乙醇提取,加水12倍量,提取2次,每次2h。仅次于最高得分的工艺分别是3号和2号,其中丹酚酸B所占总分的比重均大于6号工艺,且丹参酮ⅡA的提取含量也较高,但小于6号工艺。因此实际生产应用中,如果侧重于对丹参药材中丹参酮ⅡA的提取,可以采取6号工艺;如果兼顾丹参酮ⅡA和丹酚酸B,可以采取2号或3号工艺。
3、结论
本试验研究的工艺不仅可以根据实际生产的需要改变工藝条件,还可望为后续工作大孔树脂纯化节省成本。
参考文献:
[1]王海华.复方丹参片的稳定性分析[J].广西中医学院学报.2005(03)
[2]叶勇.丹参有效成分分离的研究进展[J].药品评价.2005(02)