【摘 要】
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目的构建人血浆蛋白S的原核表达载体并诱导其表达.方法自行设计引物,采用PCR法,以现有人血浆蛋白S真核表达载体为模板,扩增人血浆蛋白S成熟肽的编码序列.PCR产物经EcoRI和Bam
【机 构】
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南京军区福州总医院全军医学检验中心
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目的构建人血浆蛋白S的原核表达载体并诱导其表达.方法自行设计引物,采用PCR法,以现有人血浆蛋白S真核表达载体为模板,扩增人血浆蛋白S成熟肽的编码序列.PCR产物经EcoRI和BamHI双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-2T中,在E.coli BL21中诱导GST-人血浆蛋白S融合蛋白的表达.结果对重组质粒的序列分析表明,插入片段的序列与Gen Bank登录的人血浆蛋白S基因编码序列完全一致.10%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达分子量约为96 kD的产物
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