【摘 要】
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目的为肌腱组织工程筛选出一种优化的人肌腱细胞培养基,即使在不添加胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的条件下,通过优化培养基构成维持其存活并分化。方法在α-MEM培养基中,加入最佳组合的生长因子(growth factors,GF),同时加入不同浓度的FBS(0、1%、5%和10%)和不同浓度的IGF-1(0、10、50 ng/ml),TGFβ-3(0、1、10 ng/ml),
【机 构】
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天津医科大学总医院普通外科,天津医科大学总医院普通外科,天津医科大学总医院普通外科,天津医科大学总医院普通外科
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目的为肌腱组织工程筛选出一种优化的人肌腱细胞培养基,即使在不添加胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的条件下,通过优化培养基构成维持其存活并分化。
方法在α-MEM培养基中,加入最佳组合的生长因子(growth factors,GF),同时加入不同浓度的FBS(0、1%、5%和10%)和不同浓度的IGF-1(0、10、50 ng/ml),TGFβ-3(0、1、10 ng/ml),用拉马拉蓝染色法检测人肌腱细胞的生存情况、增殖速度,用天狼星红定量胶原合成。
结果在无FBS情况下,含有10 ng/ml TGFβ-3和50 ng/ml IGF-1两种生长因子的α-MEM培养基中培养14 d 后,人肌腱细胞依旧存活(6228.68±43.87),高于其他实验组,但低于10% FBS对照组(13 576.74±286.75,t=41.29,P<0.05),胶原合成量[(0.322±0.003)ng]明显大于未添加生长因子组(t=4.13~5.93,P<0.05)。
结论添加50 ng/ml IGF-1和10 ng/ml TGFβ-3优化的α-MEM培养基可维持人肌腱细胞存活长达14 d并促进肌腱细胞分化,而不必添加FBS。
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