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［目的］检测贵阳市河水中大肠杆菌O157:H7。［方法］通过大肠杆菌O157:H7毒力基因志贺样毒素2（stx2）、α-溶血素（hlyA）、紧密黏附素（eaeA）设计3对引物，并建立了实时荧光定量PCR检测方法对8株菌株进行特异性、灵敏度检测，利用该方法检测了采集自贵阳市部分河流10组水样。［结果］该方法能够特异扩增大肠杆菌O157:H7毒力基因，灵敏度为127ng/mL；检测水样结果与国标方法相比，其灵敏度为87.5%，特异度为97.1%，准确度为94.0%。［结论］该方法的建立能够为大肠杆菌O157: