【摘 要】
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利用ISSR技术对叉孢苏铁(Cycassegmentifida)遗传多样性进行研究,对影响PCR反应的DNA模板浓度、dNTP浓度、Taq酶含量、引物浓度、Mg2+浓度和退火温度等进行了条件优化.叉孢苏
【机 构】
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深圳市仙湖植物园管理处,广西大学,广西林业勘测设计院,广西百色林业局
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利用ISSR技术对叉孢苏铁(Cycassegmentifida)遗传多样性进行研究,对影响PCR反应的DNA模板浓度、dNTP浓度、Taq酶含量、引物浓度、Mg2+浓度和退火温度等进行了条件优化.叉孢苏铁的ISSR最佳反应扩增体系为:20μl反应体积2μ110×PCRbuffer,模板DNA20g,1UTaq酶,1.5～2.75mmol/LMgCl2,0.1mmol/L 4×dNTP,0.22μmol/L引物,2%甲酰胺.适宜的退火温度为50～52℃.从103条引物中筛选出12条用于所有样品的扩增,共扩增出122条带,其中多态性条带为86条,占总条带数的70.49%.POPGENE分析结果表明,种级水平上,叉孢苏铁具有中等稍高的遗传多样性水平,且各居群间有着很高的遗传分化度.
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