【摘 要】
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目的 探讨不同培养条件对大鼠外周血来源内皮祖细胞(EPC)生长情况的影响.方法 密度梯度离心法获得大鼠外周血单个核细胞,根据培养基中是否添加血管内皮生长因子(VEGF)、碱性
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目的 探讨不同培养条件对大鼠外周血来源内皮祖细胞(EPC)生长情况的影响.方法 密度梯度离心法获得大鼠外周血单个核细胞,根据培养基中是否添加血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及培养板是否预铺纤连蛋白(FN)分组培养.观察记录细胞生长情况并进行统计分析,以免疫组化和免疫荧光法进行鉴定.结果 大鼠外周血来源的单个核细胞在体外呈现贴壁生长,培养第7天各组细胞数及细胞集落数提示,在相同培养条件下,预铺FN可以促进EPC的贴壁增殖(t=4.43,P＜0.05;t=3.70,P＜0.05).在同样预铺或未铺FN的情况下,在培养液中加入生长因子可促使单个核细胞更好地向EPC分化(t=-10.96,P＜0.01;t=-13.22,P＜0.01).免疫组化及免疫荧光结果 显示,细胞培养第4、7、10天,细胞表面CD34、CDl33表达不断增强[(35.7±4.2)%、(60.1±3.8)%、(81.8±6.4)%;(3.2±0.9)%、(18.4±7.3)%、(32±3.8)%],第14天下降[(32.1±5.4)%,(1.9±2.7)%];而Flk-1表达在第4、7、10、14天均不断增强[(31.2±3.5)%、(40.6±5.3)%、(71.2±8.4)%、(81.5±4.1)%].结论 FN有利于内皮祖细胞的贴壁生长和增殖.VEGF及bFGF促进其增殖分化.内皮祖细胞的体外成功培养将为其应用于血管组织工程提供足够数量的种子细胞来源,并为外周血干细胞移植治疗多种疾病提供新的思路.
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