丝裂霉素C与表达Smac/DIABLO的肿瘤靶向腺相关病毒联用对抗恶性黑色素瘤的效果

• 作 者: 王坚 林茂 吴平 何惠娟 刘新垣
• 机 构: 广东医学院附属医院外科,广州市增城区人民医院外科,中国科学院上海生命科学研究院生化与细胞所
• 出 处: 西安交通大学学报(医学版)
• 发表日期: 2012年4期
• 关键词: 重组腺相关病毒 第2个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活剂/低pI的IAP直接结合蛋白(Smac/DIABLO) 恶性黑色素瘤 丝裂霉素C 凋亡 recombina

目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导促凋亡因子Smac/DIABLO是否能提高恶性黑色素瘤细胞对丝裂霉素(MMC)的敏感性。方法将携有目的基因的rAAV加入到培养液中转染肿瘤细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,RT-PCR检测Smac/DIABLO基因的表达,MTT法测定肿瘤细胞增殖,流式细胞术测定肿瘤细胞的凋亡;动物在体实验测定抗肿瘤效果。结果 rAAV转染96h后几乎所有细胞表达明亮的黄绿色荧光。RT-PCR检测发现转染48h后目的基因Smac/DIABLO稳定表达。MTT检测显示r