【摘 要】
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目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症小鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及其机制.方法 将60只小鼠分为假手术组、脓毒症AKI组(SAKI组)和SAKI+NAC组,每组各20只.采用盲肠结扎穿
【机 构】
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315010 浙江宁波,宁波市第一医院重症医学科
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目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症小鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及其机制.方法 将60只小鼠分为假手术组、脓毒症AKI组(SAKI组)和SAKI+NAC组,每组各20只.采用盲肠结扎穿刺法(CLP)构建SAKI小鼠模型,其中SAKI+NAC组在使用NAC(50 mg/kg)预处理3 d后行CLP.假手术组小鼠仅进行外科手术,不予CLP.模型构建成功后24 h处死小鼠,采用苏木素-伊红(HE)染色法评估小鼠肾组织病理损伤,比较3组小鼠血清肌酐、血尿素氮、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、病理学评分、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶、肾组织细胞凋亡情况以及Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、Caspase-3、Bax蛋白表达水平.结果 HE染色结果显示,假手术组小鼠肾组织切片中肾小球、肾小管和血管结构清晰正常;SAKI组小鼠可见肾小球破裂、广泛的肾小管坏死和刷状缘的丧失,间质大量炎症细胞浸润;SAKI+NAC组小鼠肾组织损伤明显减轻,肾小球、肾小管上皮细胞可见充血水肿,间质炎症细胞明显减少.假手术组、SAKI组和SAKI+NAC组小鼠血清肌酐[(39.0±1.8)、(129.6±4.8)、(81.7±2.0)μmol/L]、血尿素氮[(6.65±0.29)、(24.78±0.71)、(15.45±0.40)mmol/L]、TNF-α[(16.8±0.4)、(43.5±1.0)、(22.0±0.6)ng/L]、IL-1β[(15.2±0.7)、(44.8±1.0)、(25.5±0.8)ng/L]、IL-6[(20.8±0.4)、(70.6±2.0)、(35.8±1.2)ng/L]、病理学评分[(0.65±0.11)、(3.55±0.14)、(2.00±0.15)分]、丙二醛[(25.1±0.7)、(85.3±1.1)、(40.1±1.6)nmol/g]、SOD[(90.4±1.4)、(22.4±0.8)、(70.7±2.5)U/mg]、GSH-Px[(336.2±5.5)、(181.1±2.5)、(265.0±6.4)U/mg]、过氧化氢酶[(14.9±0.6)、(5.7±0.4)、(8.4±0.4)U/mg]、TUNEL阳性细胞数[(1.35±0.20)、(13.55±0.72)、(8.25±0.42)个]以及TLR4[(0.14±0.03)、(0.40±0.03)、(0.18±0.03)]、NF-κB[(0.20±0.04)、(0.66±0.05)、(0.16±0.03)]、Caspase-3[(0.152±0.027)、(0.464±0.061)、(0.147±0.022)]和Bax[(0.14±0.03)、(0.71±0.03)、(0.15±0.04)]蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(F=204.316、328.913、378.460、327.102、344.226、123.104、709.235、421.732、233.016、104.521、153.920、127.135、260.514、115.960、505.826,P均<0.001).进一步两两比较发现,SAKI+NAC组血清肌酐、血尿素氮、TNF-α、IL-1β、IL-6、病理学评分、丙二醛、TUNEL阳性细胞数以及TLR4、NF-κB、Caspase-3和Bax蛋白表达水平均较SAKI组显著降低,SOD、GSH-Px和过氧化氢酶水平均较SAKI组显著升高(P均<0.05).结论 NAC对脓毒症小鼠AKI有显著的保护作用,其具体机制与抑制肾组织细胞炎症反应、抗氧化损伤和抗细胞凋亡相关.
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