农杆菌质粒DNA提取方法的改良与鉴定

来源 :生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guangminghuayuan

【摘要】

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常规的农杆菌质粒DNA提取常采用碱裂解和酚、氯仿提纯方法,得率较低,一般在50ng/μl以下.针对常规碱裂解法的不足,利用含有pCGⅡ双价载体的LBA4404菌株通过增加菌液收集量、

【作者】

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单世华李春娟张君诚庄伟建

【机构】

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福建农林大学作物科学学院

【出处】

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生物技术

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

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农杆菌质粒DNA 提取方法改良鉴定碱裂解

【基金项目】

：

福建省科技厅国际合作项目

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常规的农杆菌质粒DNA提取常采用碱裂解和酚、氯仿提纯方法,得率较低,一般在50ng/μl以下.针对常规碱裂解法的不足,利用含有pCGⅡ双价载体的LBA4404菌株通过增加菌液收集量、改变提取流程中的反应条件等对常规方法进行了改良,去除了酚、氯仿提纯过程,减少了提取过程对人体的伤害,得率一般在0.5～2μg/μl.所提取质粒DNA可直接用于PCR、限制性酶切等分子生物学试验.

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