【摘 要】
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目的获得小鼠Rnf141多克隆抗体,并对其功能进行初步研究。方法利用多聚酶链反应（PCR）扩增获得鼠Rnf141基因并且与原核表达载体pGEX-5X-3（含GST标签）进行重组,将重组质粒转入大肠
【基金项目】
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国家高技术“863”计划资助项目（2001AA216091）资助
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目的获得小鼠Rnf141多克隆抗体,并对其功能进行初步研究。方法利用多聚酶链反应（PCR）扩增获得鼠Rnf141基因并且与原核表达载体pGEX-5X-3（含GST标签）进行重组,将重组质粒转入大肠杆菌BL21（DE3）,经1mmol/L IPTG在25℃条件下诱导,用SDS-PAGE检测,获得GST-Rnf141融合蛋白高效表达后,通过Glutathione Sephorase4B纯化。纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,通过Western blot和免疫组织化学的方法检测抗体的特异性。结果成功构建了重
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