【摘 要】
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【目的】研究色素上皮衍生因子PEDF表达水平与脂代谢的关系,探讨PEDF参与血脂代谢的可能调控机制,为揭示PEDF参与多种代谢疾病提供重要依据。【方法】应用Crispr/Cas9基因修
【机 构】
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广东省疾病模式动物工程技术研究中心,中山大学中山医学院生物化学教研室
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【目的】研究色素上皮衍生因子PEDF表达水平与脂代谢的关系,探讨PEDF参与血脂代谢的可能调控机制,为揭示PEDF参与多种代谢疾病提供重要依据。【方法】应用Crispr/Cas9基因修饰技术构建PEDF-/-小鼠,高脂饮食(HFD)诱导肥胖小鼠模型,检测小鼠血脂水平(甘油三脂TG、总胆固醇TC、游离脂肪酸FFAs)的变化,实时定量RT-PCR检测脂肪组织中脂肪代谢关键基因(ATGL、PPAR-γ、FAS、HSL)的表达量。【结果】基因组水平鉴定和蛋白水平检测表明PEDF-/-小鼠构建成功;HFD诱导肥胖后,野生型(WT)小鼠体重增加百分比、内脏脂肪及血脂水平均比正常饮食组(CD)的高(P<0.05),差异均具有统计学意义,说明肥胖模型构建成功,而PEDF-/-组小鼠HFD后体重增加百比、内脏脂肪和血脂水平高于CD组(P<0.05),高于WT小鼠的HFD组(P<0.05);实时定量RT-PCR结果显示,WT小鼠HFD后ATGL、PPAR-γ和FAS转录水平都比CD组低(P<0.05),HSL m RNA水平无明显差别;而PEDF敲除后,ATGL、PPAR-γ和HSL转录水平较WT组的显著下调(P<0.01),而FAS水平CD组明显升高,HFD组显著下调;PEDF敲除后,HFD组ATGL m RNA水平高于CD组,PPAR-γ和HSL m RNA水平低于CD组。【结论】成功构建PEDF基因敲除小鼠;PEDF可能通过ATGL、PPAR-γ和HSL促进了脂肪分解,通过FAS抑制脂肪酸合成,从而参与了肥胖小鼠的血脂代谢及内脏脂肪沉积。
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