RAPD扩增分枝杆菌DNA优化条件及菌型分型的诊断应用

• 作 者: 许丽 杨应周 谭卫国 林世平 胡志上 吴清芳 张玉华
• 机 构: 深圳市慢性病防治院,中国医学科学院基础医学研究所
• 出 处: 中国热带医学
• 发表日期: 2006年5期
• 关键词: 分枝杆菌 非典型性 结核杆菌 RAPD 分型 Mycobacteria tuberculosis Non - Mycobacterium tuberculo

目的探讨随机扩增多态性DNA（Randomly amplified polymorphic DNA，RAPD）技术在分枝杆菌分型诊断中优化条件及其应用价值。方法优化RAPD技术扩增分枝杆菌DNA的奈件，并分别扩增深圳市临床病人分离株DNA，对比RAPD电泳条带特征。结果以条带稳定、丰富、清晰为标准，确定引物1 RAPD最佳反应条件为：50出反应体系中，含100ng模板DNA，2．5mmol／L MgCl2，2U DNA聚合酶，引物0．5μmol／L，dATP、dGTP、dCTP和dTTP各250μmol／