【摘 要】
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目的 分析KDM5A对卵巢癌SKOV3/PTX细胞增殖的影响.方法 构建KDM5A基因表达沉默的SKOV3/PTX细胞系,分为沉默组(SKOV3/PTX-KDM5Ai)、阴性对照组(SKOV3/PTX-NC)及空白对照组(SKOV3/PTx),应用Western blot法验证KDM5A基因的沉默效果,CCK-8法检测3组细胞的增殖活性,软琼脂克隆实验检测3组细胞的克隆能力,流式细胞术检测3组细胞的周期分布比例,UALCAN数据库分析KDM5A与增殖分子CHD4、GSK3B表达的相关性.结果 沉默组SKO
【机 构】
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湖北省妇幼保健院妇科,湖北武汉430070
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目的 分析KDM5A对卵巢癌SKOV3/PTX细胞增殖的影响.方法 构建KDM5A基因表达沉默的SKOV3/PTX细胞系,分为沉默组(SKOV3/PTX-KDM5Ai)、阴性对照组(SKOV3/PTX-NC)及空白对照组(SKOV3/PTx),应用Western blot法验证KDM5A基因的沉默效果,CCK-8法检测3组细胞的增殖活性,软琼脂克隆实验检测3组细胞的克隆能力,流式细胞术检测3组细胞的周期分布比例,UALCAN数据库分析KDM5A与增殖分子CHD4、GSK3B表达的相关性.结果 沉默组SKOV3/PTX细胞系中KDM5A蛋白表达水平为(0.20±0.01),明显低于阴性对照组(0.74±0.02)和空白对照组(0.75±0.03),差异均有统计学意义(t=46.667,P＜0.01;t=47.607,P＜0.01).培养24h,沉默组细胞的增殖活性明显低于阴性对照组和空白对照组(t=3.820,P＜0.01;t=4.511,P＜0.01).沉默组细胞的克隆形成数为(265.43±13.14)个,阴性对照组细胞的克隆形成数为(384.37±19.23)个,空白对照组细胞的克隆形成数为(368.26±11.41)个.沉默组细胞的克隆形成数明显低于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(t=9.894,P＜0.01;t=8.564,P＜0.01).沉默组细胞的G0/G1期比例明显增高,与阴性对照组和空白对照组比较,差异均有统计学意义(t=8.922,P＜0.01;t=10.529,P＜0.01);阴性对照组和空白对照组细胞的G0/G1期比例比较差异无统计学意义(t=1.607,P＞0.05).KDM5A与CHD4、GSK3B均存在明显的相关性(r=0.742,r=0.603).结论 KDM5A和卵巢癌SKOV3/PTX细胞增殖密切相关,干扰SKOV3/PTX细胞中KDM5A的表达可明显抑制细胞的增殖活性和克隆能力,但其参与和调控这一过程的具体机制还有待进一步研究.
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