五节芒ISSR-PCR反应体系的优化

• 作 者: 金琳 葛刚 陈少风 杨赛钢 章泉
• 机 构: 南昌大学生命科学与食品工程学院
• 出 处: 安徽农业科学
• 发表日期: 2009年29期
• 关键词: 五节芒 基因组DNA ISSR-PCR 优化 Miscanthus floridulus Genomic DNA ISSR-PCR Optimiza
• 基金项目: 国家“973”项目子项目

［目的］保护五节芒的种质资源并为其开发利用奠定基础。[方法]以五节芒DNA为材料，分析DNA浓度、Mg^2＋浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶的含量以及退火温度对ISSR-PCR扩增结果的影响。并通过单因子试验对ISSR-PCR反应体系进行优化。［结果］建立了五节芒ISSR-PCR的最佳体系：25 μl反应体系中10×PCR Buffer 2.5 μl、0.2 mmol/L 4×dNTP、1.5 mmol/L Mg^2＋、0.75 U Taq DNA聚合酶。PCR反应程序为94