【摘 要】
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目的 探讨鸢尾苷元对帕金森病(Parkinson\'s disease,PD)模型细胞损伤的影响,分析其是否与调控miR-103a-3p/含有Src同源结构域2的衔接蛋白3(SHC adaptor protein 3,SHC3)通路有关.方法 用250 mmol/L的1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导PC12建立PD细胞模型.PC12细胞分为对照组、PD组、PD+鸢尾苷元50 μmol/L组、PD+鸢尾苷元100 μmol/L组、PD+鸢尾苷元200 μmol/L组、PD+anti-miR-N
【机 构】
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063000 河北唐山,唐山市工人医院神经内科
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目的 探讨鸢尾苷元对帕金森病(Parkinson\'s disease,PD)模型细胞损伤的影响,分析其是否与调控miR-103a-3p/含有Src同源结构域2的衔接蛋白3(SHC adaptor protein 3,SHC3)通路有关.方法 用250 mmol/L的1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导PC12建立PD细胞模型.PC12细胞分为对照组、PD组、PD+鸢尾苷元50 μmol/L组、PD+鸢尾苷元100 μmol/L组、PD+鸢尾苷元200 μmol/L组、PD+anti-miR-NC组、PD+miR-103a-3p Inhibitor组、PD+鸢尾苷元+miR-103a-3p mimic组.CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术分析各组细胞凋亡率,试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量,RT-qPCR检测miR-103a-3p表达,Werstem blot检测SHC3蛋白水平.双荧光素酶报告实验分析miR-103a-3p和SHC3靶向关系.结果 与对照组比较,PD组PC12细胞活力、SOD活性、SHC3蛋白表达显著降低(P＜0.05),凋亡率、MDA水平、LDH释放量、miR-103a-3p表达显著升高(P＜0.05).与PD组比较,PD+鸢尾苷元50 μmol/L组、PD+鸢尾苷元100 μmol/L组、PD+鸢尾苷元200 μmol/L组PC12细胞活力、SOD活性、SHC3蛋白表达显著升高(P＜0.05),凋亡率、MDA水平、LDH释放量、miR-103a-3p表达显著降低(P＜0.05).与PD+anti-miR-NC组比较,PD+miR-103a-3p Inhibitor组PC12细胞活力、SOD活性、SHC3蛋白表达显著升高(P＜0.05),凋亡率、MDA水平、LDH释放量显著降低(P＜0.05).与PD+鸢尾苷元组比较,PD+鸢尾苷元+miR-103a-3p mimic组PC12细胞活力、SOD活性、SHC3蛋白表达显著降低(P＜0.05),凋亡率、MDA水平、LDH释放量显著升高(P＜0.05).miR-103a-3p与SHC3直接结合.结论 鸢尾苷元可保护PD模型细胞凋亡和氧化损伤,其机制与抑制miR-103a-3p/SHC3通路有关.
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