【摘 要】
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根据NCBI上公布的普鲁兰酶基因的保守序列设计简并引物,以Thermococcus siculi HJ21基因组DNA为模板进行PCR,得到T.siculi HJ21普鲁兰酶的基因,测序后通过Blast（NCBI）数据库比
【机 构】
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淮海工学院食品工程学院,江南大学教育部工业生物技术重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（40746030）, 江苏省高校自然科学研究重大项目（09KJA170001）
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根据NCBI上公布的普鲁兰酶基因的保守序列设计简并引物,以Thermococcus siculi HJ21基因组DNA为模板进行PCR,得到T.siculi HJ21普鲁兰酶的基因,测序后通过Blast（NCBI）数据库比对和分析表明扩增基因有一个4056bp、编码1351个氨基酸的开放阅读框,为一新的普鲁兰酶基因。将该基因插入表达载体pET28a,并转化Escherichia coli BL21（DE3）,经IPTG诱导,测定普鲁兰酶比活力。重组转化子的细胞破碎液有高温普鲁兰酶活性,SDS-PAGE电泳
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