【摘 要】
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目的观察靶向survivin的siRNA对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建靶向 survivin的siRNA真核表达载体,采用LipofectamineTM2000转染乳腺癌细胞MCF-7,采用半定量RT- PCR、
【机 构】
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西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,西安交通大学医学院附属口腔医院医学研究中心,西安交通大学医学院第二附属医院普通外
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目的观察靶向survivin的siRNA对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建靶向 survivin的siRNA真核表达载体,采用LipofectamineTM2000转染乳腺癌细胞MCF-7,采用半定量RT- PCR、免疫组化技术检测转染前后MCF-7细胞survivin基因表达的变化;采用MTT法检测对MCF-7 细胞增殖的抑制作用;采用TUNEL法检测诱导MCF-7细胞凋亡的作用。结果靶向survivin的序列特异性siRNA可以高效抑制MCF-7细胞survivin基因的表达,在mRNA水平其表达抑制率为64．9％; 在蛋白质水平其表达抑制率为79．7％;转染靶向survivin的siRNA真核表达载体可以显著抑制MCF- 7细胞的增殖,细胞重新接种24、48 h后,其增殖抑制率分别为31．6％和33．0％;转染后24 h可以诱导12．9％的细胞凋亡。结论利用RNA干扰技术阻断survivin基因的表达可以显著抑制MCF-7细胞的增殖,并在一定程度上诱导其自发凋亡,靶向survivin的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的价值。
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