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摘要：脂肪肉瘤是一种由分化程度及异型程度不等的脂肪细胞所组成的恶性肿瘤。1994 年版的WHO 软组织肿瘤组织学分类将脂肪肉瘤分成分化良好型、黏液性、圆细胞型、多形性型和去分化性型5 种亚型。细胞和分子遗传学研究显示，分化良好型脂肪肉瘤和去分化性脂肪肉瘤，以及黏液性脂肪肉瘤和圆细胞型脂肪肉瘤有着相似的细胞和（或）分子遗传学改变。故从实际应用出发，脂肪肉瘤应分为3 大类，即分化良好型和去分化性脂肪肉瘤，黏液性/ 圆细胞型脂肪肉瘤，及多形性脂肪肉瘤。这一观点的由来在于，从2000 年起WHO肿瘤分类在常规组织病理学为基础的组织学分型中，引入肿瘤的免疫组织化学、细胞和分子遗传学特征进行分型，分类中每一个类型都将尽可能采用临床特点、形态学、免疫表型和遗传学特征予以确定，使肿瘤的每个类型均成为一个独立的病种，以有利于临床、病理和遗传学研究资料的比较。本文就脂肪肉瘤分子生物学特征作一综述。
关键词：免疫组织化学；脂肪；肿瘤；病理诊断
前言
脂肪肉瘤是软组织常见的恶性肿瘤，占软组织肉瘤的9.8%-21.0%，是软组织肿瘤发病率最高的恶性肿瘤。瘤组织由分化各个阶段的不同异型程度的脂肪母细胞及原始间叶细胞组成。诊断脂肪肉瘤最可靠的病理学诊断依据是找到蜘蛛样的脂肪母细胞，肿瘤内的分支状或丛状毛细血管网亦是诊断的主要依据之一。在实际工作中，由于很多软组织肿瘤中也可以出现类似脂肪母细胞的假脂肪母细胞，并且在一些含有粘液性间质的软组织肿瘤（如神经纤维瘤）中也可以见到分支状或丛状毛细血管网，故即使对于有经验的病理医师来说，有时也是极为困难的[1]。现就免疫组织化学免疫标记物在脂肪源性肿瘤病理诊断中的应用加以概述：
1 细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）
肿瘤发生的根本原因在于基因组的不稳定性，而G1/S和G2/M两个关键的关卡失控就有可能使本来应停止增殖或生理性凋亡的DNA受到损伤或DNA复制发生错误的细胞不停地进人细胞周期，因而造成恶性增生。因此，细胞周期蛋白依赖蛋白激酶（CDK）活性的异常与肿瘤发生之间有着密切关系。目前认为CDKs中CDK4与肿瘤发生有密切关系。CDK4基因定位于12q13，作为CDK家族成员的CDK4已被证实是一种癌基因，其异常表达可促进肿瘤的发展，其具有早期诊断和判断预后的价值。在人类的多种肿瘤中发现这一区域存在频繁的基因扩增现象，如乳腺癌[2]、恶性淋巴瘤[3]、黑色素瘤[4]、胰腺癌、食管癌等。Thway K等[5]用免疫组织化学方法检测216例脂肪源性肿瘤其中包括脂肪瘤、非典型脂肪瘤、高分化脂肪肉瘤、去分化脂肪肉瘤、多形性脂肪肉瘤、粘液性脂肪肉瘤、冬眠瘤中CDK4的表达，发现CDK4对于鉴别高分化脂肪肉瘤与非典型脂肪瘤起到辅助作用。Hostein等[6]用RT-PCR方法检测52例脂肪肉瘤组织中CDK4基因的状况发现有39例CDK4基因扩增阳性。朱芸等[7]对CDK4在脂肪肉瘤诊断中的价值加以综述，认为CDK4对诊断及鉴别诊断有一定的特异性及敏感性。
2小鼠双微体基因2（murine double minute 2，MDM2）
MDM2基因是一原癌基因，编码蛋白总分子量为90 kD，因mRNA的不同剪切可形成多种不同分子量的变异体，如p57，p64，p85，p90等。MDM2是p53调控网络中的下游基因，作为P53的重要调节因子，参与细胞生长抑制、凋亡、细胞周期调控等过程。MDM2与p53构成降解一反式激活循环通路。MDM2具有泛素化一蛋白酶降解p53的功能，而p53反式激活因子又可诱导MDM2，消除反馈循环。MDM2模式是癌蛋白一抑癌蛋白的典型作用模式。P53的2个自动反馈循环，即β-连环蛋白和蛋白激酶B（PKB）循环，其关键点在于p53与MDM2的相互作用。MDM2能使p53钝化并经蛋白酶降解，β-连环蛋白使MDM2失活，导致P53堆积；而P53反过来又反馈抑制β-连环蛋白。PKB能阻断p53活化，激活MDM2，而p53又可使PKB减少[8]。最终结果取决于各种组分之间的平衡及其他信号途径的调节。MDM2基因突变或表达异常将导致平衡的破坏，可能与细胞转化和肿瘤发生有关。人体许多肿瘤中都存在[9-11]。MDM2基因的扩增表达，且表达程度往往与肿瘤的临床分级、病理分期、是否转移有关。Sioletic S 等[12]报道在富于粘液基质的脂肪肉瘤易与其他软组织肿瘤相混淆，其选取56例富于粘液的脂肪肉瘤（22例高分化，34例去分化）采用免疫组织化学及荧光原位杂交的方法检测其中MDM2的表达情况，结果显示，MDM2在富于粘液的脂肪肉瘤与其他肉瘤相鉴别中可以作为辅助的分子标志物。Brisson M等[13]报道对87例脂肪源性肿瘤（脂肪瘤，非典型脂肪瘤，高分化脂肪肉瘤）进行回顾性分析，进行MR影像学观察及脂肪肉瘤的形态学及MDM2分子生物学的检测，发现脂肪瘤、非典型脂肪瘤及高分化脂肪肉瘤在MR影像学特点上有相当一部分病例是叠加的无法区分，所以脂肪源性的肿瘤性质可靠的依据就是形态学及MDM2分子病理学的支持。
3 TLS/FUS-CHOP融合基因
自从在慢性髓细胞型白血病细胞中发现Philadephia染色体（PH染色体）以来，发现和报道的融合基因大多数是关于白血病以及恶性淋巴瘤的。随着分子生物学技术的发展，近年在实体瘤中也发现了许多有特异性的染色体易位，特别是在一些起源于中胚层的软组织肿瘤。染色体易位以后，导致原癌基因高表达及抑癌基因表达抑制，正常细胞丧失分化能力，生长失控，最终形成肿瘤。脂肪肉瘤是一种分化程度和异型程度不等的脂肪细胞所组成的恶性肿瘤，是成年人最常见的软组织肉瘤之一，约占软组织肉瘤的9.8%一16%。脂肪肉瘤的组织学形态是多样的。目前在形态学上它主要被分为以下5类：分化良好型，黏液样，圆细胞型，未分化型和多形型。其中黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤（myxoid/round cell liposarcoma，MRCLS）为脂肪肉瘤最常见的类型之一，占50%左右，常发生在下肢深部软组织和腹膜后。有人认为圆细胞型脂肪肉瘤是黏液样脂肪肉瘤差分化的形式，它们实际上是同一疾病谱系的不同分化状态，即从分化好的黏液样到分化差的圆细胞型。细胞和分子遗传学研究表明，在95%以上黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤存在特异性t（12；16）（q13；p11）染色体易位，由此形成的TLS/FUS—CHOP融合基因对于黏液脂肪肉瘤的病理诊断及鉴别诊断有非常重的价值[14。Patil N等[15]采用RT-PCR方法检测脂肪肉瘤冰冻标本及蜡块标本中FUS-CHOP表达情况。结果显示其在脂肪肉瘤中检测具有一定的特异性。 4 肿瘤相关基因-高迁移率蛋白IC（HMGIC/HMGA2）
高迁移率族蛋白（HMG）是一系列染色质相关蛋白质，广泛存在于真核生物中，含量丰富，因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中具有较高的迁移能力而得名，HMG包括HMGA、HMGB和HMGN3个家族。HMGA家族由HMGAla、HMGA1b、HMGA1c和HMGA2 4种蛋白质组成，前3种蛋白质由同一个基因编码，只是转录后的可变剪接使这3种蛋白质长度有所不同，HMGA2由一个断裂基因编码[16]。近年来大量研究发现，HMGA2蛋白参与人类多种肿瘤的发生，如白血病[18]、胃癌[19]、大肠癌[17]、卵巢癌、甲状腺癌[20]]和非小细胞肺癌等。研究证实这些肿瘤的发生、发展均与HMGA2基因表达异常有关，并发现其表达增强与预后有关。关于HMGA2基因与肿瘤的相关性及作为预后指标的研究逐渐成为热点。肿瘤中HMGA2的高表达的具体机制尚不明确，可能是癌基因激活的结果，也可能与HMGA2基因的转位有关。HMGA2的高水平表达导致肿瘤发生、维持及进展的基因调控方面的研究较多，近年的研究提示它可能是通过调控多种与肿瘤形成和转移相关基因的表达而实现的，但其确切的机制尤其是信号通路及分子机制的报道较少。Italiano A等[21]]采用RT-PCR方法检测高分化及去分化脂肪肉瘤中多种基因的表达情况，发现HMGIC与MDM2在高分化及去分化脂肪肉瘤中起着联合的作用。
综上所述，随着对脂肪肉瘤分子病理学研究的深入展开，将有助于对该类疾病的诊断、鉴别诊断和预后判定以及新型抗肿瘤药物的研制。
参考文献：
[1] Crago AM，Singer S. Clinical and molecular approaches to well differentiated and dedifferentiated liposarcoma.Curr Opin Oncol. 2011 Jul；23（4）：373-378.
[2] Dean JL，McClendon AK，Hickey TE，et al.Therapeutic response to CDK4/6 inhibition in breast cancer defined by ex vivo analyses of human tumors.Cell Cycle. 2012 Jul 15；11（14）：2756-2761.
关键词：免疫组织化学；脂肪；肿瘤；病理诊断
前言
脂肪肉瘤是软组织常见的恶性肿瘤，占软组织肉瘤的9.8%-21.0%，是软组织肿瘤发病率最高的恶性肿瘤。瘤组织由分化各个阶段的不同异型程度的脂肪母细胞及原始间叶细胞组成。诊断脂肪肉瘤最可靠的病理学诊断依据是找到蜘蛛样的脂肪母细胞，肿瘤内的分支状或丛状毛细血管网亦是诊断的主要依据之一。在实际工作中，由于很多软组织肿瘤中也可以出现类似脂肪母细胞的假脂肪母细胞，并且在一些含有粘液性间质的软组织肿瘤（如神经纤维瘤）中也可以见到分支状或丛状毛细血管网，故即使对于有经验的病理医师来说，有时也是极为困难的[1]。现就免疫组织化学免疫标记物在脂肪源性肿瘤病理诊断中的应用加以概述：
1 细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）
肿瘤发生的根本原因在于基因组的不稳定性，而G1/S和G2/M两个关键的关卡失控就有可能使本来应停止增殖或生理性凋亡的DNA受到损伤或DNA复制发生错误的细胞不停地进人细胞周期，因而造成恶性增生。因此，细胞周期蛋白依赖蛋白激酶（CDK）活性的异常与肿瘤发生之间有着密切关系。目前认为CDKs中CDK4与肿瘤发生有密切关系。CDK4基因定位于12q13，作为CDK家族成员的CDK4已被证实是一种癌基因，其异常表达可促进肿瘤的发展，其具有早期诊断和判断预后的价值。在人类的多种肿瘤中发现这一区域存在频繁的基因扩增现象，如乳腺癌[2]、恶性淋巴瘤[3]、黑色素瘤[4]、胰腺癌、食管癌等。Thway K等[5]用免疫组织化学方法检测216例脂肪源性肿瘤其中包括脂肪瘤、非典型脂肪瘤、高分化脂肪肉瘤、去分化脂肪肉瘤、多形性脂肪肉瘤、粘液性脂肪肉瘤、冬眠瘤中CDK4的表达，发现CDK4对于鉴别高分化脂肪肉瘤与非典型脂肪瘤起到辅助作用。Hostein等[6]用RT-PCR方法检测52例脂肪肉瘤组织中CDK4基因的状况发现有39例CDK4基因扩增阳性。朱芸等[7]对CDK4在脂肪肉瘤诊断中的价值加以综述，认为CDK4对诊断及鉴别诊断有一定的特异性及敏感性。
2小鼠双微体基因2（murine double minute 2，MDM2）
MDM2基因是一原癌基因，编码蛋白总分子量为90 kD，因mRNA的不同剪切可形成多种不同分子量的变异体，如p57，p64，p85，p90等。MDM2是p53调控网络中的下游基因，作为P53的重要调节因子，参与细胞生长抑制、凋亡、细胞周期调控等过程。MDM2与p53构成降解一反式激活循环通路。MDM2具有泛素化一蛋白酶降解p53的功能，而p53反式激活因子又可诱导MDM2，消除反馈循环。MDM2模式是癌蛋白一抑癌蛋白的典型作用模式。P53的2个自动反馈循环，即β-连环蛋白和蛋白激酶B（PKB）循环，其关键点在于p53与MDM2的相互作用。MDM2能使p53钝化并经蛋白酶降解，β-连环蛋白使MDM2失活，导致P53堆积；而P53反过来又反馈抑制β-连环蛋白。PKB能阻断p53活化，激活MDM2，而p53又可使PKB减少[8]。最终结果取决于各种组分之间的平衡及其他信号途径的调节。MDM2基因突变或表达异常将导致平衡的破坏，可能与细胞转化和肿瘤发生有关。人体许多肿瘤中都存在[9-11]。MDM2基因的扩增表达，且表达程度往往与肿瘤的临床分级、病理分期、是否转移有关。Sioletic S 等[12]报道在富于粘液基质的脂肪肉瘤易与其他软组织肿瘤相混淆，其选取56例富于粘液的脂肪肉瘤（22例高分化，34例去分化）采用免疫组织化学及荧光原位杂交的方法检测其中MDM2的表达情况，结果显示，MDM2在富于粘液的脂肪肉瘤与其他肉瘤相鉴别中可以作为辅助的分子标志物。Brisson M等[13]报道对87例脂肪源性肿瘤（脂肪瘤，非典型脂肪瘤，高分化脂肪肉瘤）进行回顾性分析，进行MR影像学观察及脂肪肉瘤的形态学及MDM2分子生物学的检测，发现脂肪瘤、非典型脂肪瘤及高分化脂肪肉瘤在MR影像学特点上有相当一部分病例是叠加的无法区分，所以脂肪源性的肿瘤性质可靠的依据就是形态学及MDM2分子病理学的支持。
3 TLS/FUS-CHOP融合基因
自从在慢性髓细胞型白血病细胞中发现Philadephia染色体（PH染色体）以来，发现和报道的融合基因大多数是关于白血病以及恶性淋巴瘤的。随着分子生物学技术的发展，近年在实体瘤中也发现了许多有特异性的染色体易位，特别是在一些起源于中胚层的软组织肿瘤。染色体易位以后，导致原癌基因高表达及抑癌基因表达抑制，正常细胞丧失分化能力，生长失控，最终形成肿瘤。脂肪肉瘤是一种分化程度和异型程度不等的脂肪细胞所组成的恶性肿瘤，是成年人最常见的软组织肉瘤之一，约占软组织肉瘤的9.8%一16%。脂肪肉瘤的组织学形态是多样的。目前在形态学上它主要被分为以下5类：分化良好型，黏液样，圆细胞型，未分化型和多形型。其中黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤（myxoid/round cell liposarcoma，MRCLS）为脂肪肉瘤最常见的类型之一，占50%左右，常发生在下肢深部软组织和腹膜后。有人认为圆细胞型脂肪肉瘤是黏液样脂肪肉瘤差分化的形式，它们实际上是同一疾病谱系的不同分化状态，即从分化好的黏液样到分化差的圆细胞型。细胞和分子遗传学研究表明，在95%以上黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤存在特异性t（12；16）（q13；p11）染色体易位，由此形成的TLS/FUS—CHOP融合基因对于黏液脂肪肉瘤的病理诊断及鉴别诊断有非常重的价值[14。Patil N等[15]采用RT-PCR方法检测脂肪肉瘤冰冻标本及蜡块标本中FUS-CHOP表达情况。结果显示其在脂肪肉瘤中检测具有一定的特异性。 4 肿瘤相关基因-高迁移率蛋白IC（HMGIC/HMGA2）
高迁移率族蛋白（HMG）是一系列染色质相关蛋白质，广泛存在于真核生物中，含量丰富，因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中具有较高的迁移能力而得名，HMG包括HMGA、HMGB和HMGN3个家族。HMGA家族由HMGAla、HMGA1b、HMGA1c和HMGA2 4种蛋白质组成，前3种蛋白质由同一个基因编码，只是转录后的可变剪接使这3种蛋白质长度有所不同，HMGA2由一个断裂基因编码[16]。近年来大量研究发现，HMGA2蛋白参与人类多种肿瘤的发生，如白血病[18]、胃癌[19]、大肠癌[17]、卵巢癌、甲状腺癌[20]]和非小细胞肺癌等。研究证实这些肿瘤的发生、发展均与HMGA2基因表达异常有关，并发现其表达增强与预后有关。关于HMGA2基因与肿瘤的相关性及作为预后指标的研究逐渐成为热点。肿瘤中HMGA2的高表达的具体机制尚不明确，可能是癌基因激活的结果，也可能与HMGA2基因的转位有关。HMGA2的高水平表达导致肿瘤发生、维持及进展的基因调控方面的研究较多，近年的研究提示它可能是通过调控多种与肿瘤形成和转移相关基因的表达而实现的，但其确切的机制尤其是信号通路及分子机制的报道较少。Italiano A等[21]]采用RT-PCR方法检测高分化及去分化脂肪肉瘤中多种基因的表达情况，发现HMGIC与MDM2在高分化及去分化脂肪肉瘤中起着联合的作用。
综上所述，随着对脂肪肉瘤分子病理学研究的深入展开，将有助于对该类疾病的诊断、鉴别诊断和预后判定以及新型抗肿瘤药物的研制。
参考文献：
[1] Crago AM，Singer S. Clinical and molecular approaches to well differentiated and dedifferentiated liposarcoma.Curr Opin Oncol. 2011 Jul；23（4）：373-378.
[2] Dean JL，McClendon AK，Hickey TE，et al.Therapeutic response to CDK4/6 inhibition in breast cancer defined by ex vivo analyses of human tumors.Cell Cycle. 2012 Jul 15；11（14）：2756-2761.