【摘 要】
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目的:研究参芪扶正注射液与干扰素α(IFN-α)联用时对肝癌细胞增殖能力的影响,并通过RNA干扰技术明确其对IFN-α协同增效的作用机制。方法:运用细胞增殖实验(MTT)技术检测IFN
【机 构】
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北京中医药大学东直门医院外一科; 北京中医药大学第三附属医院医务处;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81673972);北京中医药大学自主选题项目(2016-JYB-JSMS-030);北京市通州区卫生发展科研专项(TWKY-2016-PT-01-03)
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目的:研究参芪扶正注射液与干扰素α(IFN-α)联用时对肝癌细胞增殖能力的影响,并通过RNA干扰技术明确其对IFN-α协同增效的作用机制。方法:运用细胞增殖实验(MTT)技术检测IFN-α注射液(6000 IU)单独或与参芪扶正注射液(0.5 g/L)联合时对SMMC-7721细胞增殖能力的影响;用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术和蛋白质印迹法(Western-blot)分别检测IFN-α单独或与参芪扶正注射液联用时,实验组、阴性对照组(NaCl)和空白对照组中STAT1的RNA转录和蛋白质表达情况,确定参芪扶正注射液对STAT1转录和表达的影响;运用Western blot检验STAT1基因经RNA干扰后SMMC-7721的STAT1蛋白质表达,确定干扰效果;MTT实验检测IFN-α单独或联合参芪扶正注射液作用于STAT1基因"敲低"细胞株时,对细胞增殖能力的影响。结果:与单独使用IFN-α及参芪扶正注射液相比,小剂量参芪扶正注射液与IFN-α联用可以增强IFN-α对人肝癌细胞SMMC-7721增殖能力的抑制作用,并上调STAT1 mRNA和蛋白质的表达;SMMC-7721的STAT1基因"敲低"细胞株中STAT1蛋白表达明显降低;针对SMMC-7721的STAT1基因"敲低"细胞株,参芪扶正注射液协同IFN-α与单独IFN-α及阴性对照组相比,对细胞增殖能力的影响无显著性差异。结论:参芪扶正注射液通过上调人肝癌细胞SMMC-7721中STAT1的表达,是提升干扰素α对肝癌细胞增殖能力抑制作用的主要机制之一。
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