【摘 要】
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目的本实验研究钛颗粒通过特定的信号传递通道激活巨噬细胞的转录因子核因子-IL-6(NF-IL-6)、核因子-κB(NF-κB)的表达,检测白细胞介素(IL)-1β、-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α
【机 构】
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上海第二医科大学附属瑞金医院骨科,Stanford
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目的本实验研究钛颗粒通过特定的信号传递通道激活巨噬细胞的转录因子核因子-IL-6(NF-IL-6)、核因子-κB(NF-κB)的表达,检测白细胞介素(IL)-1β、-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,并采用细胞因子抑制剂IL-10处理巨噬细胞,观察其对巨噬细胞活性的抑制作用.方法从健康人外周静脉血中分离单核/巨噬细胞,进行体外培养.巨噬细胞处理用钛颗粒浓度为 0.075% (体积比).IL-10组先用IL-10(20μg/L)预处理巨噬细胞10min,后再加入钛颗粒.按不同时间段采集细胞培养液和巨噬细胞.培养液中细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α采用ELISA方法检测.巨噬细胞经核酸抽提,采用EMSA方法检测NF-IL-6和NF-κB,并经半定量分析.结果未经钛颗粒刺激的巨噬细胞,48h内上清液中未能检测出上述细胞因子.钛颗粒刺激后2h,上清液中检测出IL-6,4h后可检测出IL-1β和TNF-α.TNF-α在12h达到高峰,IL-6和IL-1β在24h达到高峰,随后下降.IL-10在各时相抑制近一半IL-6的释放 (P 0.05). 经钛颗粒刺激后1h,EMSA方法即可检测出NF-IL-6表达,并持续表达5h.IL-10预处理的巨噬细胞,NF-IL-6的表达量减少 (P 0.05).结论钛颗粒能够激活巨噬细胞合成和释放细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α.IL-10抑制NF-IL-6的表达,从而抑制IL-6的合成和释放,为解决假体周围骨溶解问题,提供一种新的可能.IL-1选择性抑制NF-IL-6,说明巨噬细胞对不同的刺激,存在有不同的信号传递途径.
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