【摘 要】
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根据鸡的蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）基因序列进行抗原肽分析,选择含大片段抗原表位区约1500bp的-段基因（15-1515bp）设计一对特异性引物后进行RT-PCR扩增,并构建pET-32a（＋）-PERK重
【机 构】
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福建农林大学福建省兽医中药与动物保健重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金-促进海峡两岸科技合作联合基金资助项目（L1305212）.
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根据鸡的蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）基因序列进行抗原肽分析,选择含大片段抗原表位区约1500bp的-段基因（15-1515bp）设计一对特异性引物后进行RT-PCR扩增,并构建pET-32a（＋）-PERK重组质粒,将其转化至BL21（DE3）感受态细胞中.优化诱导表达条件,纯化重组蛋白后免疫兔并制备多克隆抗体.PCR鉴定、酶切鉴定和测序结果表明,pET-32a（＋）-PERK重组质粒构建成功.SDS-PAGE电泳鉴定结果表明,重组蛋白在1.0mmol·L^-1 IPTG、25尤下诱导9h
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