【摘 要】
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目的 考察芍药色素是否通过微小RNA-21(miR-21)调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框转录因子O1(FOXO1)通路保护四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠急性肝损伤.方法 将72只SD大鼠分为正常组、模型组(CCl4处理)、芍药色素组(芍药色素处理)、芍药色素+ miR-21组(芍药色素+miR-21处理)、EX527组(SIRT1特异性抑制剂EX527处理)和芍药色素+EX527组(芍药色素+EX527处理),每组12只.大鼠在第3、6和9天分别灌胃给予0.1、0.2和0.3 ml的CCl4
【机 构】
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延安大学医学院,陕西延安716000;延安大学西安创新学院,陕西西安710100;延安大学西安创新学院,陕西西安710100
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目的 考察芍药色素是否通过微小RNA-21(miR-21)调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框转录因子O1(FOXO1)通路保护四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠急性肝损伤.方法 将72只SD大鼠分为正常组、模型组(CCl4处理)、芍药色素组(芍药色素处理)、芍药色素+ miR-21组(芍药色素+miR-21处理)、EX527组(SIRT1特异性抑制剂EX527处理)和芍药色素+EX527组(芍药色素+EX527处理),每组12只.大鼠在第3、6和9天分别灌胃给予0.1、0.2和0.3 ml的CCl4,第10～16天灌胃给予芍药色素或静脉注射miR-21激动剂、腹腔注射EX527处理,1次/d.称重法检测大鼠的肝脏指数,全自动生化分析仪检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,TUNEL染色检测各组大鼠肝细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,免疫印迹实验(Western blot)分析大鼠肝组织中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、SIRT1、FOXO1和磷酸化FOXO1(p-FOXO1)表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定大鼠肝组织中miR-21表达水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠肝脏指数、ALT、AST、MDA水平、肝细胞凋亡数量、Bax蛋白、miR-21的表达水平和FOXO1/p-FOXO1值升高(P＜0.05),SOD水平、Bcl-2、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白的表达水平降低(P＜0.05),大鼠急性肝损伤造模成功.与模型组比较,芍药色素组大鼠的肝脏指数、ALT、AST、MDA水平、肝细胞凋亡数量、Bax蛋白、miR-21的表达水平和FOXO1/p-FOXO1值降低(P＜0.05),SOD水平、Bcl-2、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白的表达水平升高(P＜0.05).与芍药色素组比较,芍药色素+miR-21组大鼠肝组织的SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白水平降低(P＜0.05),FOXO1/p-FOXO1值升高(P＜0.05).EX527组大鼠SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白水平降低(P＜0.05),FOXO1/p-FOXO1水平升高(P＜0.05).而芍药色素+miR-21组或芍药色素+EX527组大鼠的肝脏指数、ALT、AST、MDA水平、肝细胞凋亡数量和Bax蛋白表达升高,SOD水平和Bcl-2表达水平降低(P＜0.05).结论 芍药色素可下调miR-21并激活SIRT 1/FOXO1同路,进而保护CCl4诱导的大鼠急性肝损伤.
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