应用PCR技术定向引入DNA小片段的策略

• 作 者: 张传生 耿立英 孟春花 杨娜娜 朱靖 杜立新
• 机 构: 山东农业大学生命科学学院,山东农业大学动物科技学院,中国农业科学院畜牧研究所
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2005年3期
• 关键词: DNA重组 DNA小片段 PCR

描述一种应用PCR技术定向引入DNA小片段和特异酶切位点的方法.为了获得m2/loxp66-EG-FP-loxp71基因片段.根据EGFP基因序列,设计一对特异引物,上、下游引物分别引入m2/loxp66、loxp71序列和Xhol、Mlul酶切位点.以pEGFP-N1质粒为模板,采用PCR扩增以合成DNA双链,插入到克隆载体pMD-18T.对重组子测序结果表明,实现了DNA小片段和酶切位点的定向引入.