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用SSR和EST-SSR两种分子标记方法相结合，对25份不列秋眠等级苜蓿材料进行遗传多样性分析。结果表明：筛选出的7对SSR引物和10对EST—SSR引物经PCR扩增后获得175条多态性带，在此基础上构建了25份苜蓿材料的SSR和EsTSSRDNA指纹图谱；采用类平均法（UPGMA）Nei氏遗传距离进行聚类，将25份材料聚成4个复合组，表明供试苜蓿材料具有较高的异质性和较丰富的遗传背景。