【摘 要】
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目的人血清25羟维生素D3[25-(OH)D3]测定对于评价体内维生素D的水平十分重要。本文拟建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血清25-(OH)D3的方法。方法人血清样本(400μl)
【机 构】
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青岛大学医学院营养研究所,青岛市产品质量监督检验所,
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目的人血清25羟维生素D3[25-(OH)D3]测定对于评价体内维生素D的水平十分重要。本文拟建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血清25-(OH)D3的方法。方法人血清样本(400μl)用纯甲醇去蛋白,离心后用正己烷进行液-液萃取。采用大气压化学离子源(APCI源),正离子多反应监测模式。色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm);流动相:100%甲醇;流速:0.2ml/min。结果 LC-MS/MS的检出限为1.0ng/ml,25-OHD3浓度在6～120ng/ml范围内,峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999),平均回收率为99.5%(范围:97.1%～103.4%),RSD为4.7%。分别用LC-MS/MS和放射免疫法检测53例血清样本,两种方法的平均浓度分别为23.69ng/ml和20.1ng/ml,LC-MS/MS比放射免疫法(RIA)平均高17.69%(P=0.083)。二者的相关性良好,RIA=LC-MS/MS-3.57,相关系数为0.883。结论本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度,易于操作,与放射免疫法相关性好,可用于测定人血清中25-(OH)D3的含量。
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