【摘 要】
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目的 探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glycoside,TSG)调控微小RNA-34a(miR-34a)/沉默信息调节因子1(SIRT1)对骨质疏松症(osteoporosis,OP)大鼠的作用及机制.方法 将60只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、TSG组(80 mg/kg)、miR-34a过表达(miR-34a-agomir)组(4 nmol/kg)、TSG+miR-34a-agomir组(80 mg/kg+4 nmol/kg)、miR-34a过表达阴性对照(anta
【机 构】
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萍乡市第二人民医院骨科,江西 萍乡337000
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目的 探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glycoside,TSG)调控微小RNA-34a(miR-34a)/沉默信息调节因子1(SIRT1)对骨质疏松症(osteoporosis,OP)大鼠的作用及机制.方法 将60只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、TSG组(80 mg/kg)、miR-34a过表达(miR-34a-agomir)组(4 nmol/kg)、TSG+miR-34a-agomir组(80 mg/kg+4 nmol/kg)、miR-34a过表达阴性对照(antagomir-NC)组,每组10只.除假手术组外,其余各组均切除双侧卵巢建立骨质疏松模型,分组给药后,检测血清丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;检测骨形态变化、外周血中miR-34a及SIRT1蛋白表达.取成骨前体细胞MC3T3-E1分为对照组、过氧化氢(H2 O2)处理组、TSG组、miR-34a-mimic组、miR-34a-NC组、TSG+miR-34a-mimic组,除对照组外,其余各组均经H2 O2诱导后分组干预,通过Hoechst33258染色法观察细胞凋亡情况;检测细胞miR-34a及SIRT1蛋白、成骨分化蛋白-碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)表达水平.结果 与模型组相比,TSG组大鼠骨小梁断裂及减少缓解,骨组织Tb.Sp、血清miR-34a、MDA表达降低(P<0.05),骨组织Conn.D、Tb.N及BMD、血清GSH-Px水平、SIRT1蛋白表达升高(P<0.05);miR-34a-agomir组大鼠骨小梁断裂及减少进一步加重,骨组织Tb.Sp、血清miR-34a、MDA表达进一步升高(P<0.05),骨组织Conn.D、Tb.N及BMD、血清GSH-Px水平、SIRT1蛋白表达进一步降低(P<0.05).TSG+miR-34a-agomir组大鼠上述指标变化与TSG组相反且差异有统计学意义(P<0.05).H2 O2处理成骨前体细胞后,与对照组相比,H2 O2处理组成骨细胞凋亡严重,miR-34a表达升高(P<0.05),SIRT1、ALP、OPN和OCN蛋白表达降低(P<0.05).与H2O2处理组相比,TSG组成骨细胞凋亡减少,miR-34a表达降低(P<0.05),SIRT1、ALP、OPN和OCN蛋白表达升高(P<0.05);miR-34a-mimic组成骨细胞凋亡进一步加重,miR-34a表达进一步升高(P<0.05),SIRT1、ALP、OPN和OCN蛋白表达进一步降低(P<0.05).TSG+miR-34a-mimic上述指标与TSG组相反且差异有统计学意义(P<0.05).结论 TSG可能通过抑制miR-34a表达,上调SIRT1蛋白表达,抑制氧化应激条件下成骨细胞凋亡,促进成骨分化,改善OP大鼠骨量减少及骨组织结构异常的症状.
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